无菌检验方法验证报告.docVIP

编码：  1. 概述： 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。本公司的无菌检查只是针对于灭菌注射用水的无菌检查。 灭菌注射用水灭菌工艺采用121℃30min过度杀菌法，按照2005年版《中国药典》的规定，注射剂的无菌检查应采用薄膜过滤法。制定的《无菌检查法标准操作规程》（SOP4.14.038-B）应经过验证后，才能批准使用。 2. 验证目的： 验证所采用的方法和条件是否适合于供试品的无菌检查。即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可以忽略不计。 3. 验证范围： 适用于灭菌注射用水无菌检查法的验证。 4. 验证人员及职责 质量部负责该验证方案的起草及组织实施； 验证小组负责验证方案的审批； 质量部参与验证的实施及监督。 5文件准备和培训 文件编号 存放地点 无菌检查法标准操作规程进出洁净区更衣标准操作规程 灭菌注射用水质量标准 灭菌注射用水检验操作规程 检查验证所需的各类文件资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。 6验证条件 6.1无菌检查室空气净化系统已经过验证并合格，仪器安装完成；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。 6.2 供试品3批6.3. 培养基及试剂： 6.3氯化钠:临用前配成0.9%浓度的溶液 6.3.2. 培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 生产厂家： 批号： 改良马丁培养基 生产厂家： 批号： 营养肉汤培养基 生产厂家： 批号： 改良马丁琼脂培养基 生产厂家： 批号：生产厂家： 批号：6.4. 验证用菌株： 金黄色葡萄球菌 ? 【CMCC（B）26003】铜绿假单胞菌 ? ? 【CMCC（B）10104】枯草芽孢杆菌 ? ? 【CMCC（B）63501】 ++,!by[9 ?生孢梭菌 ? ? ? 【CMCC（B）64941】 EhK8~ c ?白色念珠菌 ? ? 【CMCC（F）98001】 vJ/7H ?黑曲霉 ? ? ? ? 【CMCC（F）98003】 购自：6.5. 1O%$|IO^ 无菌检验仪器及相关设备压力蒸汽灭菌器 型 号： 生产厂家： 校验日期： 有效期： 生化培养箱型 号： 生产厂家： 校验日期： 有效期： 培养箱型 号： 生产厂家： 校验日期： 有效期： 验证内容 7.1. 培养基无菌性检查 每批培养基随机取不少于5支，培养14天，应无菌生长。培养基无菌性检查 7.2. 试验菌液的制备 7.2.1 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml营养肉汤培养基中,置30－35℃培养18-24小时，分别取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml含菌数小于100 CFU的菌悬液。 =BtHT( xa ?7.2.2 接种生孢梭菌的新鲜培养物至12ml硫乙醇酸盐流体培养基中,30～35℃培养18～24小时，取上述培养物1ml加9ml0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml含菌数小于100 CFU的菌悬液。 ? ? ? IRynm YVaO ?7.2.3 接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，置23－28℃培养24-48小时，取上述培养物1ml加9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液10倍递增稀释制成每1ml含菌数小于100CFU的菌悬液。 19B~5Vbfg ?7.2.4 接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中,置23-28℃培养5-7天，使大量孢子形成。用3-5ml0.9％的无菌氯化钠溶液将孢子洗脱并过滤孢子悬液至无菌试管内作为原液，取1m原液加9ml0.9％的无菌氯化钠溶液10倍递增逐级稀释制成每1ml含孢子数小于100CFU孢子悬液。10-4稀释 10-5稀释 10-7稀释 试验次数 1 2 1 2 1 2 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑曲霉菌 生孢梭菌 铜绿假单胞菌 7.3. 培养基灵敏度检查