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实验七果蝇的双因子杂交实验 湖州师范学院 生命科学学院生物系 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程 一、实验目的 1、学习果蝇两对因子杂交实验的原理和方法。 2、验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律。 3、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和数据统计处理的方法。 * 二、实验材料 黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）品系灰体残翅： EEvgvg 黑檀体长翅 ： eeVgVg 果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相 对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg） 为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。 * 三、实验仪器设备药品 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。 乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。 * 四、实验原理 自由组合规律：位于非同源染色体上的两对非等位基因，其杂合体在形成配子时，等位基因彼此分离，进入不同的配子中，非等位基因可自由组合进入同一配子，结果产生4种比例相等的配子。若显性完全， F1自交产生F2代表现出4种表型，比例为9：3：3：1。 * P： 灰体残翅（♀）×黑檀体长翅（♂） F1： 灰体长翅 EeVgvg F2 四、实验原理 正交：灰残 Eevgvg （♀）×黑长 eeVgVg （♂） 反交：黑长 eeVgVg （♀）×灰残 EEvgvg （♂） 注意：双因子杂交也可做反交，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，用做母本比较好。 正 交 自交 EEvgvg eeVgVg * 四、实验原理 EVg 1/4 Evg 1/4 eVg 1/4 Evg 1/4 EVg 1/4 1/16 1/16 1/16 1/16 Evg 1/4 1/16 1/16 1/16 1/16 eVg 1/4 1/16 1/16 1/16 1/16 Evg 1/4 1/16 1/16 1/16 1/16 1 EEVgVg 1 EEvgvg 9 E_Vg_ 2 EEVgvg 2 Eevgvg 2 EeVgVg 1 eeVgVg 4 EeVgvg 2 eevgvg 1 eevgvg 3 E_vgvg 3 eeVg_ F2 配子 * 五、实验步骤 1.选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本， 黑檀体长翅为父本，将旧瓶中的果蝇麻醉全部处死，在8h内收集处女蝇至少5只，雌雄分开培养，可提前2-3天收集。 2.杂交：将处女蝇5只和5只黑檀体雄蝇麻醉、转移到新的杂交瓶中，确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒，没有死蝇。贴好标签，于25℃培养； 3.处死亲本：7d后，处死杂交亲本。 4.观察F1：再过4-5天，F1成蝇出现，连续观察2—3天，或在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型。 * 五、实验步骤 4.F1互交：选取5对F1果蝇，分别转入一新培养瓶（不需处女蝇），贴好标签，于25℃培养。 5.处死亲本：