医学电生理学(N1)2015.9要素.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 全细胞式记录 全细胞式记录的是全细胞膜面积的，而不是小片膜的离子电流。虽然吸管内膜片被吸破，但微吸管与细胞的封接有很高的电阻（一般＞10GΩ），这是保持全细胞式记录的重要条件。全细胞记录可以进行电压钳位和电流钳位，以测定膜电流和膜电位以观察细胞水平上离子通道的机能。微吸管内灌注生理溶液使单通道电流在正常离子环境中流动，也可以换为药物或毒素等非生理成分，研究药物对电压和递质依赖性通道的影响，对通道开关动力学的作用，达到从微观水平研究药物的作用机制。实验中也可任意改变膜片内、外溶液的浓度组分，研究各组分对膜通透性的影响。或根据实验的目的和为了特殊需要，可利用这一特点而通过充灌液与胞内液的交换而改变细胞内液成分。但要注意其中H+、Ca2+浓度要适宜，Ca2+浓度要低。全细胞式记录可进行1h以上。此外，也可用相应的激动剂作用于膜受体，在监测离子通道电流流动过程中，了解经过G蛋白介导的第二信使作用，研究跨膜信息传导的途径。 3) 膜片钳术的其它方面的运用 1.膜片钳术还可和钙图象技术联合应用测定单一活细胞内的[Ca2+]。 2.单细胞离子通道表达的