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实验4药物体外抗菌试验讲解
实验四 药物体外抗菌试验 今天要用显微镜，请单学号同学去领显微镜，双学号同学不用领 1、 K—B纸片法（学生操作） 纸片法常用于测定试验菌对各种抗生素的敏感性，所以又叫做药物敏感试验，在临床上可作为选择用药的重要依据。 操作步骤 1 培养试验菌：将菌种斜面培养物移种到肉汤培养液中，37℃培养过夜，使菌液浓度约为1.5×108cfu/ml. 2 涂布试验菌：用无菌吸管吸取一滴菌液滴加在MHA平板上，用无菌涂布棒（L棒）将菌液在整个平板上涂布均匀。 3 贴含药的滤纸片：用无菌镊子贴加含药滤纸片。 4 将平板倒置于37 ℃培养24h，观察结果，测定抑菌圈的大小，并对照NCCLS的解释标准来判断试验菌的药敏性。 注意事项 1 以上各不操作要严格的无菌操作，镊子和L棒都要用酒精烧过之后冷却再使用。 2 贴纸片的时候一定要一次把纸片定位好，接触琼脂后就不能再移动含药滤纸片。 3 不同的抗菌药物其抑菌圈直径的敏感/耐药分界点不一样；有的抗菌药物对不同的菌种的分界点也不一致；应根据NCCLS最新公布的分界点数据来读取药敏试验的结果。 2、连续稀释法 连续稀释法：人为配置连续梯度的药物浓度来检测其抗菌能力，从而找出药物的最小抑菌浓度。 最小抑菌浓度（MIC）：能抑制测试菌生长的最低药物浓度即为MIC。 最小杀菌浓度（MBC）：能杀死测试菌的最低药物浓度即为MBC。 试验测试(1h) 1、革兰氏染色 做好后请用油镜调好后举手示意 2、平板分区画线 做好后做好标记（学号）将平板扔到玻璃缸中 * 微生物与免疫学实验 琼脂扩散法 连续稀释法 纸片法 2.0cm 2.5cm 青 先 链 庆 K-B纸片法示意图 试验菌平板 *
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