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冰冻切片弹性纤维(elastic)马森(masson)染色试剂
冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂盒产品说明书
(中文版)
主要用途
冰冻切片弹性纤维(ELASTIC)马森(MASSON)染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫(Verhoeff)苏木素以及三色染料(trichrome),分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
弹性纤维(elastic fiber),又称为黄色纤维(yellow fiber),是固有结缔组织(Connective tissue proper)细胞外基质的成分之一,由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质(elastin)、原纤维蛋白(fibrillin;FBN)等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带(periodontal ligament)、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症(cutis laxa)、威廉姆斯综合征(Williams Syndrome)等疾病。基于摩罗利 (mallory)首次应用三色系统的方法,马森(masson)进行了改良,在三色复合染料体系中,使用苯胺篮(aniline blue)替代绿篮。同时使用伟郝夫(Verhoeff)苏木素选择性染色弹性纤维,三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白(fibrin)等组织成分。马森方法操作复杂,可以细致区分多种组织成分。
产品内容
清理液(Reagent A) 200毫升
固着液(Reagent B) 10毫升
韦格液(Reagent C) 100毫升
祛色液(Reagent D) 20毫升
岑克液(Reagent E) 100毫升
范氏液(Reagent F) 10毫升
比氏液(Reagent G) 10毫升
酸性液(Reagent H) 10毫升
染色液(Reagent I) 10毫升
修正液(Reagent J) 10毫升
脱水液A(Reagent K) 10毫升
脱水液B(Reagent L) 10毫升
透明液(Reagent M) 10毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照;试剂具有腐蚀性,注意安全;有效保证6月
用户自备
小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器
培养箱或烘箱:用于样品反应孵育
微波炉:用于样品反应孵育处理
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
实验步骤
样品固着处理
准备好5微米厚的冰冻切片
小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面
室温下孵育2分钟
小心移去切片上的清理液(Reagent A)
小心加上200微升固着液(Reagent B)在切片上,铺满整个切片样品表面
室温下孵育5分钟
小心移去切片上的固着液(Reagent B)
小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,铺满整个切片样品表面
室温下孵育2分钟
小心移去切片上的清理液(Reagent A)
样本染色处理
操作一:标准染色
小心加入1毫升韦格液(Reagent C)在切片上,铺满整个切片样品表面
放进60℃恒温培养箱孵育60分钟
小心移去韦格液(Reagent C)
室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液(Reagent A)
小心加入200微升祛色液(Reagent D)在切片上,铺满整个切片样品表面
室温下孵育5分钟
小心移去祛色液(Reagent D)
室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液(Reagent A)
小心加入1毫升岑克液(Reagent E)在切片上,铺满整个切片样品表面
放进60℃恒温培养箱孵育60分钟
小心移去岑克液(Reagent E)
室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育2分钟
小心移去切片上的清理液(Reagent A)
小心加入200微升范氏液(Reagent F)在切片上,铺满整个切片样品表面
室温下孵育30分钟
小心移去范氏液(Reagent F)
室温下,小心将切片置入50毫升清理液(Rea
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