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植物生物技术的概念：植物生物技术: 指对植物品质和性状进行改造的生物技术 植物生物技术核心技术及其在农业生产中的应用 创造新材料 培育新品种 开发功能食品 快速繁殖稀有材料 材料的指纹分析 新基因挖掘、定位、辅助育种等 第一章 植物组织培养的应用： （1）快速繁殖和规模化生产 （2）培养无病毒植株 （3）培育转基因植物 （4）突变体筛选 （5）制成人工种子 灭菌的方法和原理 （1）灭菌方法 物理灭菌：高温高压灭菌 干热灭菌 射线照射灭菌 过滤灭菌 化学灭菌：熏蒸灭菌 消毒液灭菌 （2）灭菌原理 （a）高温高压灭菌 原理：将待灭菌的物品放在一个密封的高压高温灭菌锅内，在121℃高温和每平方厘米1个大气压下，一般持续15－20 min，就可杀死一切微生物的营养体及其孢子，适于器皿、工具、衣物和培养基灭菌。 （2）过滤灭菌法 原理：将带菌的液体或气体通过孔径小于0.45μm微孔滤器装置， 使液、气体通过滤膜流入无孔瓶中。 培养基的种类和特点 目前发展出的培养基有几十种，但常用的有MS、B5、white、N6、SH、KM8P等。 （1）MS培养基 1962年Murashige和Skoog为培养烟草组织时设计的，是目前应用最广泛的一种培养基。 无机盐浓度高，养分平衡，尤其是铵盐和硝酸盐的含量很大 它不适合生长缓慢、对无机盐浓度要求比较低的植物，尤其不适合铵盐过高易发生毒害的植物。 与MS培养基基本成分较为接近的还有LS、RM培养基，LS培养基去掉了甘氨酸、盐酸吡哆醇和烟酸；RM培养基把硝酸铵的含量提高到4950mg/L，磷酸二氢钾提高到510 mg/L。 （2）White培养基 1943年由White设计的，1963年做了改良。 无机盐浓度较低 适于生根培养 （3）N6培养基 1974年，朱至清等学者为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的 KNO3和（NH4）2SO4含量高，不含钼 适于花粉和花药培养。 （4）B5培养基 1968年由Camborh等设计的 含有较低的铵盐，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素。铵盐可能对不少培养物的生长有抑制作用 适合于某些双子叶植物特别是木本植物的生长。 （5）SH培养基 1972年由SchenkHid和Hidebrandt设计的。 它的主要特点与B5相似，不用（NH4）2SO4，而改用NH4H2PO4，是无机盐浓度较高的培养基 在不少单子叶和双子叶植物上使用，效果很好。 KM8P Kao and Michayluk 1975 有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，呼吸代谢中的主要有机酸。 主要用于原生质体培养 培养基的成分及配制方法 培养基中包括植物生长必需的15种营养元素和某些生理活性物质，可概括为四大类： 1、无机营养物:植物生长发育中非常重要 镁（Mg）是叶绿素分子的一部分 钙（Ca）是细胞壁的组分之一 氮（N）是各种氨基酸、维生素、蛋白质和核酸的重要组成部分 此外，铁（Fe）、锌（ Zn）和钼（Mo）等是某些酶的组成部分。 植物除了碳（C）、氢（H）和氧（O）外，已知还有12种元素对于植物的生长是必需的，它们是氮(N)、磷（P）、钾（K）、硫（S）、钙(Ca)、镁(Mg)、铁(Fe)、锰（Mn）、铜（Cu）、锌(Zn)、硼（B）和铝（Al）。 前6种元素需要的数量较大，称之为大量元素或主要元素 后6种元素需要的数量较小，称为微量元素或次要元素 按照国际植物生理协会的建议，植物所需要的浓度大于0.5mmol/L的元素为大量元素，小于0.5mmol/L的元素为微量元素 2、有机营养成分 主要包括碳源（糖类）和维生素类 最常用的碳源是蔗糖和葡萄糖 使用浓度为2%－5% 作为植物生长发育所需的营养物质 调节培养基中的渗透压 维生素： 硫胺素（维生素B1）一般认为是一种必需的成分 吡哆醇（维生素B6），烟酸（维生素B3），泛酸钙（维生素B5）和肌醇也都能显著地改善培养的植物组织生长状况 3、植物生长调节物质(激素） 主要有五大天然激素（和人工合成的生长调节物质生长素）： 植物五大天然激素的合成部位 吲哚乙酸 分生组织、种子 细胞分裂素 根尖 赤霉素 生长的种子 脱落酸、乙烯 成熟、衰老和环境条件 4、其他附加物 不是植物生长所必需的，但对细胞生长有益 （1）凝固剂 琼脂(agar)是固体培养基的必要成分，琼脂是一种由海藻中提取的高分子碳水化合物，本身并不提供任何营养 琼脂能溶解在热水中，成为溶胶，冷却至40℃即凝固为固体状凝胶。 （2）抗生素 抗生物质(antibiotic)，包括青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在5—20mg/L之间 添加抗生物质可防止菌类污染，减少培养中材料的损失，尤其是快速繁殖中，