实验八邻二氮菲分光光度法测定铁.docVIP

实验八 邻二氮菲分光光度法测定铁 目的要求 1．学习如何选择吸光光度分析的实验条件。 2．学习吸收曲线、工作曲线的绘制及最大吸收波长的选择。 3. 了解分光光度计的结构和使用方法 重点：吸光光度分析的实验条件分光光度计、实验原理 邻二氮菲是测定微量铁的较好试剂。pH=2～9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的红色合物，其1gK稳=21.3反应式如下： 　合物的最大吸收峰在510mm波长处?，摩尔吸光系数ε= 1.1×104邻二氮菲1gK稳=·HCl）将Fe3+离子还原成Fe2+，反应如下： 2Fe3++ 2NH2OH·HCl 2Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl- 测定时，控制溶液的酸度在PH5左右较为适宜。酸度高，反应进行较慢；酸度低，则 Fe2+水解，影响显色。 本方法的选择性很强，相当于含铁量40倍的Sn2+，Al3+，Ca2+，Mg2+，Zn2+，SiO32-20倍的Cr3+，Mn2+，V，PO43-5倍的Co2+，Cu2+等均不干扰测定。、 主要仪器和试剂 1. 仪器：721分光光度计，10mL吸量管，50mL容量瓶，1cm比色皿 2. 试剂： (1) 100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取0.8g AR级 NH4Fe(SO4)2·12H2O于烧杯中，用30mL 2 mol·L-1HCl溶解，然后转移至1 000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 (2) 10μg·mL-1铁标准溶液：00μg·mL-1铁标准溶液水 (3) 100 g·L-1盐酸羟胺水溶液（临用时配制）(4) 1·5 g·L-1邻二氮菲 (5)1mol·L-1醋酸钠溶液 (6) 6mol·L-1HCl溶液 （三）、 实验步骤 1、 条件实验 （1）吸收曲线的制作和测量波长的选择：吸取g·mL-1铁标准溶液50mL容量瓶（或比色管）中，加入1mL盐酸羟胺溶液，5mL NaAc溶液和2mL邻二氮菲，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min，用cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标准溶液）为参比溶液，在40～50nm之间，每隔10nm测一次吸光度在最大吸收峰附近，每隔nm测定一次。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A和λ 关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。 （2）溶液酸度的选择：取7个50mL容量瓶（或比色管），分别加入1mLg·mL-1铁标准溶液，1mL 盐酸羟胺，2mL Phen，摇匀。然后，用滴定管分别加入0.0,2.0,5.0,10.0,15.0,20.0,30.0mL浓度为0.10 mol·L-1的NaOH溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min。用1cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。同时，用pH计测量各溶液的pH值。以pH值为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与pH值关系的酸度影响曲线，得出测定铁的适宜酸度范围。 （3）显色剂用量的选择：取7个50mL容量瓶（或比色管），各加入1mLg·mL-1铁标准溶液，1mL盐酸羟胺，摇匀。再分别加入0.1,0.3,0.5,0.8,1.0,2.0,4.0mL Phen和5.0mL NaAc溶液 ，以水稀释至刻度，摇匀，放置10min。用1cm 比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。以所取Phen溶液体积为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与V的显色剂用量影响曲线。得出测定铁时显色剂的最适宜用量。 （4）显色时间：在一个50mL容量瓶（或比色管）中，加入1mLg·mL-1铁标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。再加入mL Phen，5mL NaAc，以水稀释至刻度，摇匀。立即用1cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测量吸光度。然后依次测量放置5，10，30，60，120min，…后的吸光度。以时间t为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与t的显色时间影响曲线。得出铁与邻二氮菲显色反应完全所需要的适宜时间。 2、铁含量的测定 （1）标准曲线的制作：50mL容量瓶（或比色管）分别10μg·mL-1的铁标准溶液0.0 2.0、 4.0、 6.0、 8.0、10.0mL 于6只容量瓶中，分别加入1mL盐酸羟胺，5mL NaAc 溶液及2mL 邻二氮菲摇匀，水稀释至刻度，摇匀后放置10min。用cm比色皿，以试剂为空白（即0.0mL铁标准溶液），在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。 用绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe2+Phen络合物的摩尔吸光系数ε。试样中铁含量的测定：根据标准曲线求出试样中铁的含量（μg·mL-1）。 1、试样中铁