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菘蓝指纹图实验设计方案 水溶性成分的分析用高效液相色谱法 2.1实验材料：菘蓝的实生苗（根、茎、叶），组培苗（愈伤组织、不定芽） 2.2实验方法： 2.2.1 取新鲜的实验材料用蒸馏水洗干净放入烘干机里烘干，研成粉末。 2.2.2 粉末过40目筛，用电子分析天平精密称取样品1.0g，置50mL锥形瓶中， 加（甲醇、50%甲醇、75%甲醇、水），超声提取1h。 2.2.3 离心取上清液，0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，用旋转蒸发仪浓缩后 用20ml甲醇溶解。 2.2.4 于高效液相色谱仪中分析，进样前将样液用0.22μm的微孔滤膜过滤 液相色谱条件： 流速：0.3 ml/min、0.6ml/min、1.0 ml/min 2、进样量：5μl、10μl 3、用DAD进行全波长扫描（210~400nm） 4、柱温：25
℃ 5、(流动相：甲醇（A）：水（B）梯度洗脱 t/min 甲醇 水 0~5 90% 10% 5~20 80% 20% 20~45 75% 25% 45~65 10% 90% (流动相: pH6 .4，0.1mol/l的醋酸钠缓冲液( A )-乙腈 ( B ) , 梯度洗脱 t/min 0.1mol/l醋酸钠缓冲液 乙腈 0~5 97% 3% 5~45 95% 5% 45~55 70% 30% 55~65