实验十四霉菌的形态观察.pptVIP

实验十四  霉菌的形态观察 一、目的要求 1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。 2. 了解四类常见霉菌的基本形态特征。 二、基本原理（1） 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3~10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。 观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本节课用载玻片培养观察法。 二、基本原理（2） 载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。 三、实验器材 1. 菌种 曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) 和毛霉（ Mucor sp. ）培养 2~5d 的马铃薯琼脂平板培养物。 2. 培养基 土豆琼脂或察氏琼脂。 3. 仪器或其他用具 无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片， U 型玻棒，解剖针，解剖刀，镊子， 50% 乙醇， 20% 的甘油以及显微镜等。 四、操作步骤——载玻片培养观察法 培养小室的灭菌 在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 121 ℃ 灭菌 30min ，烘干备用。 琼脂块的制作 取已灭菌的马铃薯琼脂 培养基 6~7ml 注入另一灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成 0.5~ 1cm 2 的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。（注：制作过程应注意无菌操作 。） 接种 用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。（注：接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察 。） 培养 先在平皿的滤纸上加 3 ～ 5ml 灭菌的 20 ％甘油（用于保持平皿内的湿度 ) ，盖上皿盖， 28 ℃ 培养一周。 镜检 根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。 五、实验报告 1. 结果 绘图说明四种霉菌的形态特征。 2. 思考题 （ 1 ） 你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌 （ 2 ） 你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和 霉菌的主要区别是什么 ？ 曲霉图片——24h曲霉 曲霉图片——24h曲霉足细胞 曲霉图片 根霉图片（1） 根霉图片（2） 根霉图片（3） 根霉图片（4） 青霉图片（1） 青霉图片（2） 青霉图片（3） 青霉图片（4） 青霉图片（5） 毛霉图片（1） 毛霉图片（2） * *