BLOT-HP-2012幽门螺杆菌抗体分型.pptVIP

反应过程 实验材料 蒸馏水 1000ul可调加样枪一支 10ul加样枪一支 吸嘴 500ml带盖瓶 摇床一台 操作步骤 在量杯中将浓缩洗涤液用蒸馏水按 1：10 的比例稀释成洗涤应用液。 每槽加入洗涤液1ml， 再加待测血清或全血10ul， 放在摇床上摇动30分钟。 取出反应槽，弃去槽中液体，并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体，每槽加入洗涤液1ml，摇动洗涤1分钟，弃去槽中液体，并在平铺的纸巾上将其倒置经磕以拍干剩余液体，重复洗涤3次； 每槽加入洗涤应用液500ul，再加酶联试剂10ul，放在摇床上摇动30分钟。 同（ 3 ）洗涤3次。 加显色剂 0.5ml，5分钟后观察结果。 待质控带和阳性带显色清晰，弃去槽内液体，用流水（自来水或蒸馏水）冲洗后取出印迹膜，等干后对比《标准带》判断结果。 结果判断 判断标准 CagA抗体 + - VacA抗体 + - UreA抗体 + - UreB抗体 + - 1、质控带未出现：表示本次试验无效。 2、阴性结果：显色区带仅出现质控带，未见任何一条阳性 区带，表示被检者血清中无HP抗体。 3、Ⅱ型HP抗体阳性：仅UreA和UreB区带中任意一种或同 时出现，未见CagA、VacA区带。 4、Ⅰ型HP抗体阳性： CagA、VacA区带中任意一种或两种同时出现。 产品适应症 各种胃、十二指肠疾病：包括胃、十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃癌和胃淋巴瘤等； 非溃疡性消化不良； 缺铁性贫血口服铁剂治疗效果不佳者； 儿童消化不良或不明原因的生长发育迟缓者。 产品禁忌症 本产品检查无任何禁忌症，不需要空腹可随时进行采血检测。 产品安全性 本产品属于体外诊断试剂类产品，不直接使用人体，对人体不造成创伤性损害。 本产品为各种胃、十二指肠疾病的辅助诊断，任何疾病的诊断均需要结合临床病史资料综合判断。 注意事项 1、室温大于20度小于37度 2、试剂盒使用前要平衡室温 3、加酶标的时候要换枪头 4、严格操作流程 HP分型检测产品特点 国内唯一能检测HP分型的体外诊断试剂 能直接观察HP血清学毒性反应全貌，包括了CagA、VacA、尿素酶A和B 可多人份同时检测，整个时间仅需1.5小时 仅需10微升被检血清 特异性强（97.0%）；敏感性高（98.0%） 部分学术论文 吴水河，刘家双，张阳德，等。幽门螺杆菌 CagA、VacA抗体与胃十二指肠疾病的相关性研究。中国内镜杂志， 2003; 9(3): 11-13. 余悠悠，沈霞。现代免疫学杂志， 2004, 24(6): 511-513. 张玫 汤哲 周英智，等。北京地区老年人群幽门螺杆菌感染的血清流行病学研究中华流行病学杂志，2005；26（9）：687-689。 张玫，汤哲，汤欣，等. 社会因素对老年人群幽门螺杆菌感染的影响. 世界华人消化杂志 2005, 13(14): 1779-1780. 陈肖肖，尚世强，来庆和，等. 具有cagA、vacA 基因的幽门螺杆菌及其表达产物的研究. 中华儿科杂志 2003, 41(1): 56-57. 杨光，林蔚，陈曼彤，等. 幽门螺杆菌感染的血清学分型检测以及临床治疗. 胃肠病学和肝病学杂志 2006, 15(1): 29-31. 陈海英 ，番敏 ，张柳，等。免疫印迹技术在临床幽门螺杆菌检测中的应用。中国实验诊断学，2OO6；10（9）：995-996. 王韶英，惠萍萍，叶荣菊,等.幽门螺杆菌感染与结肠息肉关系的研究.同济大学学报(医学版),2009;30(3):56-58. ……… Thanks！ 革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。 * 幽门螺杆菌及其分型的临床意义 幽门螺杆菌（H.pylori ） 1982年澳大利亚学者Marshall和Warren从胃黏膜中分离出Hp 常见于人的胃窦和幽门部位 可通过一端多条鞭毛移动 是一种革兰氏阴性螺旋菌 分泌高活性的尿素酶和过氧化氢酶 VacA、CagA导致宿主的炎症反应 Marshall和Warren 1979年根据活组织切片检查结果，Warren发现50%左右的病人的胃腔下半部分附生着许多微小的、弯曲状的细菌。Warren的发现引来了同行的质疑，但也引起了Marshall的极大兴趣，他们决定联合对取自100个病人的活组织切片进行研究。 经过反复试验，Marshall成功地培育出一种当时尚不为人知晓的细菌——后来被命名为幽门螺杆菌。基于试验结果