常用染色液的配制.docVIP

一、常用染色液的配制 ⒈ 碘-碘化钾（I2-KI）溶液 能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ； 碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉ 苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉 ； 95％酒精10ml ； 过滤后再加入10ml甘油 （2）先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊ 1％醋酸洋红（aceto carmine） 酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。 配方：洋红1g ； 45％醋酸100ml 煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。 ⒋ 改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine） 核染色剂。 配制步骤： 先配成三种原液，再配成染色液。 原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。 原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。 原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。 （原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用） 染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。 适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。 ⒌ 中性红（neutral red）溶液 用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。 配方：中性红 ；蒸馏水100ml 使用时再稀释10倍左右。 ⒍ 曙红Y（伊红，eosin Y）酒精溶液 常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。 配方：曙红 ； 95％酒清100ml 也常用于95％酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。 ⒎ 钌红（ruthenium red）染液 钌红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。 配方：钌红5～10mg ； 蒸馏水25-50ml ⒏ 龙胆紫（gentian violet） 为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。 配方：龙胆紫0.2~1 g ；蒸馏水100ml ⒐ 苯胺兰（aniline blue）溶液 为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。 配方：苯胺兰1 g ； 35％或95％酒精100ml ⒑ 间苯三酚（phloroglucin）溶液用于测定木质素。 配方：间苯三酚5g ； 95％酒精100ml 注：此溶液呈黄褐色即失效。 ⒒ 橘红G（orange G）酒精溶液 为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。 配方：橘红G 1g ； 95％酒精100ml ⒓ 番红（safranin O）为碱性染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红G、结晶紫作三重染色。 配方：（1）番红水溶液番红0.1或1 g ；蒸馏水100ml （2）番红酒精溶液番红0.5或1 g ；50％（或95％）酒精100ml （3）苯胺番红酒精染色液 甲液 番红5 g +95％酒精50ml 乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml 将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。 ⒔ 固绿（fast green）又称快绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。 配方：（1）固绿酒精液固绿0.1 g ； 95％酒精100ml （2）苯胺固绿酒精液固绿 1 g ；无水酒精 100ml ；苯胺油 4ml 配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。 ⒕ 苏木精（hematoxylin）染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料，是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏（Heidenhains）苏木精染色液，又称铁矾苏木精染色液。 配方：甲液（媒染剂）： 硫酸铁铵（铁明矾）2-4g ；蒸馏水100ml