实验室常用几种细胞实验的实验步骤和细胞荧光染色方法小结.pptVIP

关于染菌问题 a 常见的多为真菌感染，细胞瓶内可见白色菌丝。一旦出现此种情况，需要立刻丢弃细胞瓶。孵箱内重新进行灭菌处理 b 常见细菌感染 如杆菌 球菌 支原体等 c 最近实验室出现黑胶虫染菌现象 对于“黑胶虫”的处理方法：首先，血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到56度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。 第二，血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无_ 第三，细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。 4 关于细胞冻存 a 10%的DMSO、40%胎牛血清、50%培养基 b 4℃,40分钟;-20 ℃,30分钟;-80 ℃ ,24h后液氮罐保存 c 如果冻存细胞多要先把冻存液配好放四度冰箱(因为DMSO放热，刚加进去和容易损伤细胞，常温DMSO对细胞毒性也大。) d 冻存的原则是慢冻快苏 关于荧光染色 实验步骤1 细胞取出固定2h后，也可4℃保存多日后一起染色 2 将