第十二章造血干细胞及免疫细胞的生成.pptVIP

第十二章 造血干细胞及免疫细胞的生成 第一节 造血干细胞的特性和分化 一、造血干细胞的起源和表面标记 造血干细胞的起源： （哺乳动物）最早卵黄囊→胎肝→（胚胎发育中期及出生后） →骨髓 早期的造血干细胞：多能造血干细胞（具自我更新和分化两种潜能） →（最初分化为）共同淋巴样祖细胞和共同髓样祖细胞等。 造血干细胞的表面标记 人造血干细胞的主要表面标记为CD34和c-kit(CD117)，无谱系特异性标记（Lin-）： 1.CD34 是造血干细胞的一种重要标记分子，为高度糖基化跨膜蛋白，包括造血干细胞，有1%~4%骨髓细胞表达CD34。应用CD34可从造血组织中分离造血干细胞，成熟血细胞不表达此分子。 2.CD117即c-kit 是干细胞因子（stem cell factor）的受体，为原癌基因c-kit的产物kit，属于含有酪氨酸结构的生长因子受体 。CD117+约占骨髓细胞的1%~4%，50%~70%CD117表达CD34，故CD117也是多能造血干细胞的重要标记。 3.Lin-细胞 应用针对T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞、巨核细胞、髓系、红系等多种谱系相应单克隆抗体的混合抗体（CD2、CD3、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、 CD66b、血型糖蛋白质A等抗体）结合免疫磁珠分离法，除去造血组织中各谱系细胞，所留下即为Lin-细胞（早期造血干细胞）。 二、造血干细胞的分化 多能造血干细胞的分化 : 骨髓、胸腺造血微环境提供造血干细胞发育分化的必要条件。通过动物体内或人工体外半固体微环境条件模拟，可进行造血干细胞分化的研究。 多能造血干细胞的分化 : 骨髓、胸腺维持造血干细胞自我更新和分化的机制： I 分泌细胞因子或其他介质，促进不同谱系不同发育阶段细胞生长分化。如胸腺基质细胞分泌的细胞因子IL-7及肽类分子胸腺激素、胸腺素、促胸腺生成素是胸腺中T细胞成熟的重要条件。 II 造血微环境基质细胞通过粘附分子及分泌的细胞外基质与干细胞及其分化的血细胞相互作用，提供必要刺激信号。 （1） T细胞受体基因重排 （a）TCRα和β链基因重排：αβT细胞约占T细胞95％～99%，γδT细胞约占1％～5%。胸腺细胞在双阴性（DN）阶段的一个时期，即CD44low CD25+阶段，β链基因开始重排，表达β链蛋白，并与前T细胞替代α链PTα（Pre T Cel1α）组装成PTα：β二肽链，表达于CD44-CD25-阶段的细胞表面，此时细胞增殖活跃，IL-7R的表达对这个时期的分化发育至关重要；分化至CD4+CD8+PTα:βCD3low的双阳性（ DP）阶段，细胞停止增殖，α链基因开始重排，并表达有功能性的TCRαβ。 （2）CD3及CD4/CD8的表达：阳性与阴性选择 阳性选择 在胸腺皮质中，同胸腺上皮细胞表达的自身肽：MHCⅠ类或Ⅱ类分子复合物以适当亲和力进行特异结合的DP细胞，可继续分化为单阳性（SP）细胞，其中与Ⅰ类分子结合的DP细胞CD8表达水平升高，CD4表达水平下降直至丢失 ; 而与Ⅱ类分子结合的DP细胞，CD4表达水平升高，CD8表达水平下降最后丢失；不能与自身肽：MHC分子复合物发生有效结合或发生亲和力过高结合的DP细胞，在胸腺皮质中发生凋亡，占DP细胞的95%以上。约5％的DP细胞经选择而存活，此过程称为胸腺的阳性选择（postive selection）。 经阳性选择的DP细胞存活，并分化为SP细胞，使T细胞获得了在识别过程中自身MHC限制能力。 识别MHCI类分子的胸腺细胞发育为CD8+细胞，而识别MHCⅡ类分子的胸腺细胞发育为CD4+细胞。 阴性选择（negative se1ection），系DP及SP细胞在皮质区、皮髓质交界处及髓质区，与胸腺DC、巨噬细胞表达的自身肽：MHC I类或Ⅱ类分子发生高亲和力结合的而被消除，或成为无能状态，以保证入外周淋巴器官的T细胞库中不含有针对自身成分的T细胞，也是T细胞自身免疫耐受的主要机制。 胸腺 CD4+ 与MHC 适当 不与MHC-自身肽 CD4+ TCR重排 CD8+ 结合的T细胞 结合的T细胞 Th细胞 T T 阳性选择 阴性选择 T CD8+ 双阳性