慢性心力衰竭病人外周血炎性因子和Th1Th2细胞因子变化与心功能关系的临床研究.doc

慢性心力衰竭病人外周血炎性因子和Th1/Th2细胞因子变化与心功能关系的临床研究 古锡钦 （广东省梅州市五华县人民医院 广东 梅州 514400） 摘要：目的：观察慢性心力衰竭患者血清炎症因子及Th1/Th2细胞因子的改变，并探讨其与心功能的关系。方法：将符合纳入标准的60例慢性心力衰竭患者和50例健康人分别设为观察组和对照组，采用ELISA法检测血清中C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的变化，ELISA法检测Th1/Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4（IL-4）的变化，并同步评估心功能指标。结果：与健康人相比，心力衰竭患者血清中CRP、TNF-α和IL-6水平明显升高（P 0. 05），与心功能的恶化呈正相关；心力衰竭患者Th1/Th2比值升高，升高程度与心功能恶化成正相关。结论：心力衰竭患者外周血炎性因子水平上升，Th1/Th2细胞因子失衡，这两者皆与心功能密切相关。 慢性心力衰竭（Chronic Heart Failure, CHF）是由多种原因引起心脏结构和功能发生变化，进而导致心室射血和（或）充盈功能低下，并出现相应的临床表现的综合征，它是大多数心血管疾病的最终归宿和死亡原因。在我国，慢性心力衰竭患者将近400万人[1]，有约50%的患者会在5年内死亡[2]。 越来越多的证据表明，炎症在心力衰竭的发生和发展中起着重要的作用[3]。研究表明，在心力衰竭的患者的血清炎性标志物如TNF-α、IL-18和CPR等均升高，且与心力衰竭的严重程度呈正相关[4]，但是到目前为止，仍然没有足够证据证明可以利用炎性标志物去指导心力衰竭的治疗[5]。本实验研究心力衰竭患者血清标志物和细胞因子与心功能的关系，旨在为心力衰竭的炎症因子变化提供科学依据，并为临床治疗疗效提供参考。 1 临床资料 1.1 病例纳入标准：入选的110病例分别来自某市人民医院，参照陈灏珠主译〔美〕《临床心脏病学》充血性心力衰竭诊断的主要标准和次要标准，并根据美国纽约心脏病学会（NYHA）分为心功能分为四级。观察组应符合慢性心力衰竭的诊断标准，NYHA心功能分级在Ⅱ-Ⅳ级，年龄介于40岁≤年龄≤80岁的患者，排除梗阻性心肌病、瓣膜病、缩窄性心包炎、大量心包积液、肺栓塞、急性心肌梗死，感染性心内膜炎，以及合并严重的肝、肾功能不全，内分泌系统、造血系统等严重原发性疾病者。对照组选择在以上医院体检的健康人，年龄介于40岁≤年龄≤80岁。 1.2 病例基本情况：观察组60人，其中男性32人，女生28人，平均年龄为52.7±6.9岁，其中NYHA Ⅱ级18例 ，NYHAⅢ级23例，NYHAⅣ级19例；对照组50人，其中男性23人，女性27人，平均年龄为54.1±7.2岁。两组性别和年龄对比无统计学差异。 1.3 统计学方法 采用统计学软件SPSS13.0，计量资料以表示, 两组均数比较采用独立样本t检验，多组计量资料间比较采用单因素方差分析，以P 0. 05为差异有统计学意义。 2 观察指标和方法 入院后当天进行对患者进行心功能分级。分别采集患者和健康人上肢肘静脉血4mL, 离心分离血清，采用ELISA法检测CRP、TNF-α和IL-6，试剂盒购自广州健阳生物技术公司。选择IFN-γ/IL-4代表Th1/Th2比值，分别采用ELISA法检测。检测程序：1）加样：标准曲线设置：以一条8 孔设置，每孔加入样品稀释液100μL，取样品100μL 至A 孔依次稀释至G孔(第7孔)，第8孔为空白对照，各孔浓度依次为：2000 ，1000 ，500 ，250 ，125 ，62.5 ，31.3 ，0 pg/mL 必要时置复孔。余各孔依次加入阴性血清及待测样品各100μL 。2）将反应板置37℃120min。3）洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤6次向滤纸上印干。4）每孔加酶标抗体工作液100μL 。5）将反应板置37℃45 ～60min。6）洗板：同前。7）每孔加OPD 底物工作液100μL 置37℃暗处反应5～10min。8）每孔加入50μL 终止液混匀。9）于490nm处测吸光值，换算出中因子表达量。 3 结果 3.1 心力衰竭与健康人血清CRP、TNF-α和IL-6水平 表1 两组血清CRP、TNF-α和IL-6水平比较 组别 例数 CRP(mg/L) TNF-α(ng/L) IL-6(ng/L) NYHAII级 18 6.21±1.89*★ 13.97±3.24*★ 19.27±4.26*★ NYHAIII级 23 6.89±2.02* 16.23±3.59* 25.78±4.89*△ NYHAIV级 29 7.57±2.11*△ 18.55±3.6