木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制研究.doc

木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制研究 【摘要】目的：研究木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制；方法：以1.25g/L、2.5g/L、5g/L、10g/L的木犀草素溶液对骨肉瘤MG-63细胞行划痕实验、侵袭实验、免疫印迹实验，并观察经不同浓度木犀草素溶液培养后骨肉瘤MG-63细胞形态；结果：木犀草素对于骨肉瘤MG-63细胞的生长、增值、运动迁移能力、穿膜细胞数量、IL-6蛋白表达水平均有一定的抑制作用，并且其抑制作用随着木犀草素浓度的增加而逐渐增加；结论：一定浓度的木犀草素对于骨肉瘤MG-63细胞具有极强的抑制作用，值得应用于临床骨肉瘤的治疗。 【关键词】木犀草素；骨肉瘤；抑制效应；机制 the mechanism of inhibitory effect of luteolin on osteosarcoma [Abstract] Objective: inhibitory effect on human osteosarcoma and its mechanism of luteolin; methods: 1.25g/L、2.5g/L、5g/L、10g/L luteolin solution on osteosarcoma MG-63 cell line scratch test, invasion assay, Western blot, and observe the different concentration of mignonette fibroin solution cultured osteosarcoma MG-63 cell morphology; results: luteolin for osteosarcoma MG-63 cell growth, proliferation, movement ability, transmembrane cell number, the expression level of IL-6 protein was inhibited, and the inhibition increased with the increase of luteolin concentration increases gradually; conclusion: a certain concentration of luteolin has a strong inhibitory effect on human osteosarcoma MG-63 cells, treatment is applied to clinical osteosarcoma. [keyword] luteolin; osteosarcoma; inhibitory effect; mechanism 骨肉瘤是临床相对常见的恶性肿瘤，多发于少儿或青少年，该病预后不良，相当多的患者因患上该病而死亡1。近几年来，随着保肢手术的不断发展以及全新化疗药物的研制成功，骨肉瘤的治疗疗效有了较大的提高。但是，转移以及复发的骨肉瘤患者预后依然相当差，并且继发转移以及耐化疗药物骨肉瘤的出现仍然是相当严重的问题2。作为来源于植物的黄酮类物质，木犀草素能够干扰骨肉瘤细胞新陈代谢的正常进行，抑制其生长，诱导其凋亡，对于骨肉瘤的治疗具有较高的应用价值3、4。为研究木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制，为临床治疗骨肉瘤提供依据，我院于2013年6月——2014年5月展开相关研究，其效果显著，现作如下总结报道。 1 材料与方法 1.1 材料 细胞系：选择浙江大学药学院培养的人体骨肉瘤MG-63细胞系。 药物：木犀草素（Sigma公司产品） 试剂：小牛血清（GIBCO公司产品），RPM1640培养基粉剂（GIBCO公司产品），胰蛋白酶（Amersco公司产品），β-actin抗体（Sigma公司产品），IL-6（Sigma公司产品），辣根过氧化物酶标记二抗（Jackson公司产品）。 仪器： 通用台式冷冻离心机（Sigma公司产品）、倒置相差显微镜（OLYMPUS公司产品）、SG403A-HE生物安全柜（Baker公司产品）、CO2培养箱（Forma公司产品）、全自动高压灭菌锅（ALP产品）、电子分析天平（Sigma公司产品）、紫外-可见光光度计（Hach公司产品）。 1.2 实验方法 1.2.1细胞系培养：将骨肉瘤MG-63细胞系置于37℃、5%CO2培养箱内，以小牛血清（10%）、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素配置而成的RPM1640培养液贴壁培养。倒置荧光显微镜观察骨肉瘤MG-63细胞生长，胰蛋白酶（0.25%）消化传代，选择处于生长期的骨肉瘤细胞进行实验。 1.2.2 观察骨肉瘤MG-63细胞形态 取