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名解 5*2 判断5*1 选择10*0.5 填空 40*0.5 问答 5*10 防疫检验检疫技术 第一节 防疫检验的任务与内容 疫：由致病微生物引发的，具有强烈的传染性、病情危重凶险的一类疾病。 特点：其传播能力与病源微生物的种类、传播途径、传播媒介等有关。其既可以只在一个种属内传播，也可在多个种属间传播。 自然疫源地 natural epidemic focus：自然界中某些野生动物体内长期保存某种传染性病原体的地区。 常见的人畜共患病：流行性乙型脑炎、禽流感、口蹄疫、链球菌病、炭疽、布鲁氏菌病、结核病、破伤风、狂犬病、肉毒梭菌中毒病、猪丹毒、李氏杆菌病、钩端螺旋体病、住肉孢子虫病、血吸虫病、肝片吸虫病、疯牛病等。 人间传染的病原微生物：病毒，160种；特殊病原体，6种；细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体，155种；真菌，55种。 实验室感染原因及其预防：接种、混匀、研磨、移液、开封、离心、注射、搬运等在检验操作过程中的各个环节都可能产生危险的微生物气溶胶，应采用标准操作方法减少微生物气溶胶的产生。 接种：无弹性的铂丝。先内焰后外焰 混匀：避免气泡的产生 研磨：先加助研剂。切忌研棒捣击 移液：移液管上端塞上棉花 开封：开封或开启时，减少压力气流的变化 离心：与转速匹配的带塞离心管，底垫完好 注射：针头上加有脱脂棉的小试管 搬运：密封，外表面消毒 微生物检验的质量保证 质量保证是指微生物学实验室所规定的客观而系统的保证检验质量的措施，以便达到和保持检验工作的最佳水平。 质量控制是保证实验室的检验结果的精确性、可靠性和可重复性的自我控制过程，是质量保证体系的一个重要方面。 质量控制包括内部和外部两方面。内部质控是指实验室内规定的主要是对培养基、菌种、试剂、仪器设备等质量监测和评价的措施。对实验室发生的差错或事故以及纠正措施的详实记录。外部质控是对各实验室间的质量评定，通过国内相关机构的检查，并接受国际检验质量控制机构的质量检查。 无菌操作：1.防尘源性污染的措施，2.防人源性污染，3.防实验动物和实验材料自身的污染。 微生物学检验的一般程序：1.直接镜检，2.快速诊断和直接药敏试验，3.常规检验，4.报告。 细菌形态学检查方法： 1.不染色检查法（悬滴法： 将特制凹玻片凹窝四周涂少许凡士林。用接种环或尖吸管取菌液滴加于盖片中部，将凹玻片凹窝对准菌液悬滴扣上，让凡士林贴封四周并迅速翻转。盖玻片在上，菌液悬于盖玻片下。静置片刻，于高倍镜或油镜下观察；压滴法：将菌液用接种环或尖吸管滴加于载玻片中央，直接将盖玻片盖压其上，镜下观察，操作时应避开气泡。压滴法操作简单，不需特制凹玻片，但因液体易干，故观察时间不宜过长。观察烈性传染病（如霍乱弧菌）时应小心操作，防止液体外溢，造成实验室污染） 2.染色检查法（染色材料准备→涂片制备→染色；初染→媒染→脱色→复染（革兰氏染色）；初染→脱色→复染（抗酸染色）；染色时，需要从细菌结构、染液配制、培养条件、药物作用、电解质含量、菌龄、染色温度及时间等诸多方面进行考虑；常用染料，碱性、酸性、中性） 3.负染色检查法（背景着色而被观察物不着色的染色检查方法。用于观察活体标本；墨汁法，背景呈墨褐色，菌体透亮。观察新型隐球菌，高倍镜下可见圆形，厚壁，围绕菌体的荚膜和芽生现象；刚果红法，背景呈蓝色，活菌无色，死菌可着色；苯胺黑-碱性复红法，背景黑色，菌体呈红色，荚膜为围绕菌体之亮圈）。 糖分解产物试验（各种细菌含有发酵不同糖类的酶，分解糖类的能力各不相同，且不同细菌分解同一种糖的代谢产物也不一定相同。伤寒沙门菌分解葡萄糖产生甲酸等酸性物质；副伤寒沙门菌在分解葡萄糖时除产生甲酸外，还可产生CO2等气体）。 细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样。 糖发酵试验：葡萄糖 HCOOH 脱氢酶 CO2+H2 大肠埃希菌 伤寒沙门菌 葡萄糖 ＋ ＋ 乳 糖 ＋ － 甲基红（methyl red）实验： 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇（中性） 甲基红 － 葡萄糖→丙酮酸（酸性） 甲基红 ＋ VP（Voges-Proskauer）试验： 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇（＋）→二乙酰→红色化合物（＋） ↑ 胍基化合物 葡萄糖→丙酮酸 ○乙酰甲基甲醇（＋） 蛋白质分解产物试验（细菌对蛋白质的分解一般先由胞外酶将复杂的蛋白质分解为短肽(或氨基酸)，渗入菌体内，然后再由胞内酶将肽类分解为氨基酸。明胶液化，凝固血