栀子提取工艺的优化.docVIP

栀子提取工艺的优化 摘 要：目的 ：研究栀子中有效成分栀子苷最佳提取方法和条件。方法：以栀子苷含量为考察指标，以 H LP C、紫外分光光度法为含量测定方法，对栀子的不同提取工艺进行比较，采用正交设计法优选出栀了苷的最佳提取工艺。结果：醋酸乙酯提取法对栀子苷的提取量最大，且提取物中栀子黄色素杂质很少，提温度为75℃，料液比为 50mL，浸提时间为 3 h，浸提级数为 1，栀子苷提取得率为 4．12％。结论：醋酸乙酯提取法为最佳提取方法，浸提温度为75℃，料液 比为 1：5(g：mL)，浸提时间为 3 h，浸提级数为 1为栀子苷提取最佳条件。 关键词：栀子，栀子苷，HPLC，紫外分光光度法，正交试验，提取工艺 实验材料 栀子，江西省樟树中药饮片厂；UV．2201PC型紫外．可见分光扫描仪(日本岛津)，栀子苷对照品 (中国药品生物制品检定所，批号：110749，200309)；其余试剂均为分析纯。 实验方法 1 栀子栀子苷的含量测定方法 1．1 对照品溶液的配制 精密称取栀子苷对照 品1 1．83mg，置25mL量瓶中 ，加甲醇溶解并稀释至刻 度 ，摇匀，精密量取5mL置50mL量瓶中，加甲醇稀释 至刻度 ，分别精密吸取对照品溶液 1、2、4、6、8mL，置 lOmL~瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。 1．2 样品溶液的配制 精密量取定容后的样品溶液lmL，置20mL量瓶中，用甲醇定容至刻度 ，摇 匀，滤过，精密量取续滤液lmL，置50mL量瓶中，加 甲醇稀释至刻度 ，摇匀 ，备用。 1．3 检测波长的确定 采用紫外分光光度法 ，以 栀子苷对照品溶液和样品溶液，在200~600nm下扫 描 ，在238nm波长处均具有最大吸收，故确定检测波长为238nm。紫外扫描图见图1。 图1 对照品和样品的UV扫描图 2．1．4 标准曲线的绘制 取上述配制 的系列对照 品溶液，在238nm波长处测定吸光度 ，结果见表1。 表1 线性关系考察结果 栀子苷浓度（ug/ml） 4.732 9.464 18.928 28.392 37.896 吸光度（OD）值 0.166 0.255 0.500 0.750 0.998 以对照品浓度为横坐标 ，吸收度为纵坐标 ，绘 制标准 曲线 ，经回归处理，回归方程为： A=0．0254C+0．0283 R=0．9993 由此可见，栀子苷的浓度在4．732-37．8561~g／mL 的范 围内线性关系良好 。结果见图2。 图 2 栀于苷标准曲线 2．1．5 方法学考察 精密度考察结果：取6份浓度 18．928p~g／mL的栀子苷对照品溶液 ，在238nm波长下 测定吸光度 ，计算RSD=0．23％，表明方法的精密度良好。 精密度考察结果 编号 1 2 3 4 5 6 RSD(%) 吸光度 0.501 0.501 0.502 0.502 0.499 0.500 0.23 稳定性考察结果 ：取新配制的乙醇回流样品溶 液，每 1h测定 1次 ，连续测定 6次 ，计算 RSD= 0．63％，表明样品溶液在 6h内基本稳定。 表 3 稳定性考察结果 编号 1 2 3 4 5 6 RSD(%) 吸光度 0.409 0.410 0.414 0.412 0.416 0.411 0.63 重复性考察结果：取同一批乙醇回流样品溶液 6份 ，按样 品溶液的配制项下配制 ，测定吸光度，计 算 RSD=I．60％，表明重复性 良好。 表 4 重 复性考察结果 编号 1 2 3 4 5 6 RSD(%) 吸光度 0.451 0.456 0.452 0.457 0.467 0.468 1.6 回收率考察结果：取栀子药材 6分，每份 0．05g， 精密称定 ，加入浓度为 90．121．zg／mL的对照品溶液 10mL，按乙醇回流方法及样 品溶液的配制方法操 作 ，测定 吸光度，计算加样回收率 ，其平均值为 102．31％，RSD=0．85％(n=6)。 表 5 回收率考察结果 编号 样品栀子苷的含量（ug） 加入量（ug） 测得量（ug） 回收率（%） 平均值（%） RSD(%) 1 916.2 901.2 1883.3 103.63 2 903.6 901.2 1858.9 103.00 3 905.4 901.2 1838.5 101.77 102.31 0.85 4 907.2 901.2 1843.1 101.92 5 901.8 901.2 1825.7 101.26 6 910.8 901.2 1853.8 102.31 3．2 提取方法的比较 取干燥的栀子果实(除去腐烂变质)，去壳