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第十六章 免疫分析仪器 * 免疫分析法：应用不同的标记物，以抗原抗体相互结合为基础的免疫学测定方法。 * 类型：(1)用酶作标记物，称为酶免疫分析法。 (2)以化学发光物质作标记，为化学发光免疫分析法。 (3)用放射性核素作标记物，称为放射免疫分析法。 第一节 酶标分析仪 一、酶免疫分析法 * 分类：有两种类型。 (1)均相酶免疫测定：主要用于药物测定。 (2)非均相酶免疫测定：也叫酶联免疫吸附测定(ELISA)，常用于医学检验。 二、酶标仪的工作原理及结构 (1)微机：可通过控制电路控制微孔板在X和Y方向的移动。 (2)微孔板：是一透明塑料板，板上有装载待测样品的多排小孔。 1、原理：采用比色法。光源光线经滤光片后成单色光，射入微孔板中待测样品后被吸收掉一部分，透射光到达光电检测器，经放大及模数转换后，送入微机处理、显示和打印结果。 2、光路系统：光源发出的光，经聚光镜、光栏、到反射镜作900反射后，垂直通过比色溶液，然后经滤光片到达光电管。 3、酶标仪和光电比色计的不同点： 两者都用比色法测定，不同点为 (1)装载比色液的容器不是比色皿，而是塑料微孔板。 (2)光束垂直通过待测液即微孔板。 (3)通常不用吸光度A而是用光密度OD表示。 4、酶标仪类型：有两种。 (1)单通道：分自动型和手动型。 (2)多通道：均为自动型，特点是检测速度快。 三、EL312E型酶标仪简介 是美国BIO-TEK公司的产品。 1、光学系统原理：采用比色法。滤光片类型为后密封式干涉滤光片，半通带宽度10nm；比色板为标准96孔板。 2、技术指标：如表。 四、半自动微孔板式ELISA分析仪结构 在酶标仪的基础上再配置加液器、温育器、洗板机、测读仪。测定中需由手工将微孔板移至下一步骤的仪器中进行。 五、全自动微孔板式ELISA分析仪结构 自动化酶免疫分析系统由 加样系统、温育系统、洗板系统、判读系统、机械臂系统、液路动力系统、软件控制系统等组成 第二节 化学发光免疫分析仪 * 发光剂：指能产生化学发光反应的物质，也叫发光底物。 一、化学发光免疫分析法 1、概念：利用化学发光作为抗原抗体反应的指示系统，用于定量检测抗原或抗体的方法。 2、类型：有化学发光标记免疫测定和化学发光酶免疫测定两种。 * 发光现象：指物质分子吸收能量后跃迁到激发态，当激发态分子返回基态时，以发射可见光的形式释出能量的现象。 * 化学发光：是指由化学反应产生的发光现象。 二、 ACS-180SE全自动化学发光免疫分析仪简介： 由德国拜耳(BaYer)公司生产。 (一)性能特点： (1)检测灵敏度高，达10-15g/ml。 (2)分析速度快，达180个测定/hr，并可同时完成13个项目。 (3)采用两点定标法，节省时间和试剂消耗。 (二)仪器测定原理 利用化学反应和免疫反应相结合的原理和方法，采用微量倍增技术，因而灵敏度很高。 * 选用的化学发光剂为吖啶酯。 (三)仪器结构： 包括主机和微机两部分，外观如图。 1、主机： 包括原材料配备、液路、机械传动、光路检测等部分。 2、微机系统： 功能有程控操作、自动监测、指示判断、数据处理、故障诊断等。 第三节 放射免疫测定仪器 一、放射免疫分析概述： 1、历史： 1959年：美国学者Berson和Yalow，用131I作示踪，首次创立血浆微量胰岛素的测定方法。定名为放射免疫分析(RIA)。 1977年：获诺贝尔生物医学奖。 2、特点： 放射免疫具有高特异和高灵敏两个基本特点。 (1)高特异：即用特异的抗体取代了化学试剂，不再是针对物质的局部基团，具有很高特异性。 (2)高灵敏：是指创造性地应用了放射性核素示踪技术，具有很高灵敏度。 3、设备类型： 标记的核素分两类，发射?射线的核素用?仪测量。发射能量较低的?射线的核素用?仪测量。 二、放射性核素的基本概念 * 核素：指有确定质子数和中子数的原子核所对应的原子统称。核素有1900多种，其中279种是稳定的，其余都是不稳定的，会发生衰变并放射出射线，故称为放射性核素。 * 同位素：质子数相同而中子数不同的一类核素。 * 同质异能素：核内中子数和质子数都相同，但原子核所处能量状态不同的核素。 (一)放射性核素衰变方式 1、?衰变：原子核放出?粒子(氦核)而衰变为另一种原子核的过程。 2、?衰变：有两种。 (1) ?-衰变：原子核内放射出电子和反中微子的衰变。 (2) ?+衰变：原子核内放射出正电子和中微子的衰变。 3、电子俘获：原子核俘获一个核外电子，使核