正交设计优选酒炖女贞子的炮制工艺.doc

正交设计优选酒炖女贞子的炮制工艺 张学兰, 侯 杰, 唐 超, 郭 方, 李慧芬 (山东中医药大学,山东济南250355) 关键词:女贞子;酒炖工艺;正交试验;红景天苷;特女贞苷 摘要:目的:优选酒炖女贞子的最佳炮制工艺。方法:以红景天苷和特女贞苷含量为评价指标,以黄酒用量、水用量、闷润 时间和炖制时间为考察因素,采用正交试验设计L9(34)表安排实验,综合评判,优选酒炖女贞子的炮制工艺。结果:优 选出的酒炖女贞子最佳炮制工艺为:取净女贞子,加其重量20%的黄酒,不加水,闷润1 h,蒸汽加热炖制10 h。结论:优 选出的酒女贞子炮制工艺合理可行。 女贞子为木犀科植物女贞Ligubtrum Lueidum Ai.t的干燥成熟果实,具有滋补肝肾、明目乌发的功 能。其主要含有环烯醚萜苷类、三萜类、苯乙醇类、 脂肪油等。环烯醚萜苷类成分有特女贞苷、女贞苷 G13、女贞苷等;三萜类成分有齐墩果酸、熊果酸等; 苯乙醇类成分有红景天苷、3, 4-二羟基苯乙醇-B-D- 葡萄糖苷等。女贞子酒制后寒滑缓和之性、补肝肾 作用增强[1]。现代各地酒女贞子的炮制方法主要 有酒蒸和酒炖,但尚缺乏客观的工艺技术参数和科 学的饮片质量标准。目前对酒女贞子的炮制工艺研 究,多以特征性不强的脂溶性成分齐墩果酸和熊果 酸含量为评价指标,而对环烯醚萜苷类、苯乙醇苷类 等水溶性活性成分在炮制过程中的变化关注较少, 尚不能客观确切地反映女贞子酒制前后的本质变 化。本研究以特女贞苷和红景天苷含量为评价指 标,以黄酒用量、水用量、闷润时间和炖制时间为考察因素,采用正交试验设计,综合评判,优选酒炖女 贞子的炮制工艺。 1 仪器与试药 Agilent1100高效液相色谱仪(含DAD二极管 阵列检测器,美国Agilent公司); JA2003N型电子天 平(感量0. 001 g,上海科技仪器公司); FA1604N型 电子天平(感量0. 000 1 g,上海精密科学仪器有限 公司); KQ-250E型医用超声波清洗器(功率250 W,频率40 kHz,江苏昆山市超声仪器有限公司); 电磁炉(南海市富士宝家用电器有限公司)。 女贞子药材购自济南市建联中药店,经本校周 凤琴教授鉴定为木犀科植物女贞Ligubtrum Lueidum Ait的干燥成熟果实。红景天苷对照品(中国药品 生物制品检定所,供含量测定用,批号为110818- 200404);特女贞苷对照品(本课题组从女贞子中分 离精制而得,纯度98% );黄酒(浙江古越龙山绍 兴酒股份有限公司,酒精度\16. 5% vol);高效液相 用乙腈、甲醇(色谱纯);其余试剂均为A.R。 2 方法与结果 2. 1 正交试验设计 根据5中国药典6及各省、市中药炮制规范,酒 炖女贞子,一般每100 kg净女贞子用黄酒20~30 kg;闷润时间一般为0~4 h;炖制时间一般为6 h,个 别地区为12~24 h[2]。另据文献记载,女贞子酒炖 时,除加其重量20%的黄酒外,还要加其重量5%的 水[3]。实际调查发现,生产中多是取女贞子药材, 用清水快速洗净,加黄酒拌匀,炖制。故本实验选取 黄酒用量、水用量、闷润时间和炖制时间作为考察因 素,每个因素安排3个水平,选用L9(34)正交表安 排实验,具体安排见表1,正交试验安排见表2。 表1 因素与水平表 水平 因 素 黄酒用量/%n A 水用量/% B 闷润时间/h C 炖制时间/h D 1 20 0 1 6 2 25 10 2 8 3 30 20 4 10 注:n为净女贞子重量的百分数。 2. 2 样品的制备 取净女贞子100 g,平行9份,按表2的工艺组 合进行炮制。具体操作方法如下:取净女贞子100 g,加辅料拌匀,闷润,密封,放入锅屉上,用蒸汽加热 炖制规定时间,取出,放凉,烘箱中50e烘干,取出 放凉,塑料袋密封,即得1~9号样品。 2. 3 水分含量测定 取各样品粉末(过2号筛)2. 5 g,精密称定,按 5中国药典62005年版一部附录ùH水分测定法 (烘干法)测定,结果水分含量在4. 83% ~7. 12%。 按干燥品计算样品中各指标成分的含量。 2. 4 红景天苷含量测定[4] 2. 4. 1 色谱条件 色谱柱:KromasilC18柱(5Lm, 4. 6 mm@200 mm);检测波长: 224 nm;柱温: 30e; 流动相:乙腈-水(7B93);流速: 1. 0 mL/min。 2. 4. 2 供试品溶液的制备 取各样品粉末(过3号 筛)约0. 2 g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入30% 乙醇20 mL,密塞,摇匀,称定重量,超声处理30 min,取出,放冷,再称定重量,用30%乙醇补足减失 的重量,摇匀,滤过,取续滤液即得。 2.4. 3 对照品溶液