水样测定方法及仪器使用.docVIP

五日生化需氧量（BOD5） 人们常常利用水中在一定条件下有机物分解所消耗的氧量，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。 水样的采集与保存：水样采集时应充满并密封于瓶中。0—4℃下进行保存。一般应在6h内进行分析。在任何情况下，贮存时间不应超过24h。 一、稀释接种法 生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。 1.方法原理 目前国内外普遍规定于20土1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升(mg/L)表示。 不同废水应采取的处理方法： 某些地面水及大多数工业废水，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1mg/L以上。 2.仪器 恒温培养箱(20℃土1℃)。 5-20L细口玻璃瓶 1000ml量筒。 玻璃搅捧：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定-小直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 溶解氧瓶：200—300ml带有磨口玻璃塞，且有供水封用的钟形口 虹吸管 YSI溶解氧测定仪 3.试剂 磷酸盐缓冲溶液 将8.5g磷酸二氢钾(KH2P04)，21.75g磷酸氢二钾，33.4g七水合磷酸氢二钠(Na2HP04·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4Cl)溶于水中，稀释至1000ml。此溶液的pH应为7.2。 硫酸镁溶液 将22.5g七水合硫酸镁(MgS04·7H20)溶于水中，稀释至1000m1。 氯化钙溶液 将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000 m1。 氯化铁溶液 将0.25g六水合氯化铁(FeC13·6H2O)溶于水，稀释至1000 m1。 盐酸溶液(0.5mol/L) 将40m1（ρ=1.18g/ml)盐酸溶于水，稀释至1000ml。 氢氧化钠溶液(0.5mol/L) 将20g氢氧化钠溶于水，稀择至1000m1。 亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3=0.025mol/L) 将1.575g亚硫酸纳溶于水，稀释至1000ml，此溶液不稳定，需每天配制。 葡萄糖-谷氨酸标准溶液 将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC—CH2—C H2—CHNH3—COOH)在103℃干燥1h后，各称取150mg溶于水中，移入1000ml容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。 4.步骤 准备所需配制的药剂（1）—（8），配制稀释水。 将各种玻璃器皿洗净、烘干，检查、校准溶解氧测定仪及培养箱。 水样的预处理： 水样的pH值若超出6.5—7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节pH近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸进行中和。 需经稀释水样的测定 稀释倍数的确定： 地面水，由测得的高锰酸盐指数与一定的系数的乘积，即求得稀释倍数。 高锰酸盐指数（mg/L） 系数 5 — 5—10 0.2、0.3 10—20 0.4、0.6 20 0.5、0.7、1.0 ②工业废水，由COD值来确定，通常需作三个稀释比。 由COD值分别乘以系数0.075，0.15，0.225，即获得三个稀释倍数。 稀释操作 一般稀释法 按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水于1000ml量筒中，加入需要量的均匀水样，再引人稀释水至800ml，用带胶板的玻棒小心上下搅匀搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。按不经稀释水样的测定相同操作步骤，进行装瓶、使用溶解氧测定仪测定当天溶解氧和培养5d后的溶解氧。另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水作为空白试验。测定5d前后的溶解氧。 计算 经稀释后培养的水样 BOD5（mg/L）=[( C1 －C2)－(B1－B2)f1]/f2 式中，B1—稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧（mg/L）； B2一稀释水(或接种稀释水)在培养后的溶解氧(mg/L)； f1—稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占比例； f2—水样在培养液中所占比例。 注f1，f2的计算：例如培养液的稀释比为3%，即3份水样，97份稀释水，则f1= 0.97，f2=0.030 注意事项： 玻璃器皿应彻底洗净。先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最后依次用自来水、蒸馏水洗净。 在两个或三个稀释比的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于lmg/L时，计算结果时，应取其平均值。若剩余的溶解氧小于1mg/L，甚至为零时，应加大稀释比。溶解氧消耗量小于2mg/L，有两种可能，一是稀释倍数过大，另一种可能是微生物菌种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。这时可能出现在几个稀释比中，