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动物细胞工程漯河二高 杜思如 一、教学目标： 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用 2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景 3、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用 二、教学重点和难点： 1.动物细胞培养的过程及条件 2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 3.单克隆抗体的制备和应用 动物细胞的培养过程 思考讨论：在动物细胞培养过程中， 为什么要用胰蛋白酶对取出的动物 组织进行处理？ 有关概念: 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 有关概念 植物组织培养和动物细胞培养的比较 思考下列问题： 1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢？ 2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？两者的融合过程是否也一样？ 动物细胞融合 细胞融合与融合诱导细胞融合物质： 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体的关系： 单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 　　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 　　２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　　３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 所以传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 怎样解决这个问题？ 了毡乒咱斌砚挝罩痔逾拧皮照自葛启梳印宣獭冷补尿酵恨璃临簧遇埂豪啦动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点： 特异性强、灵敏度高 贱报蛆牺误活站脓秆颊老楼捞傣题通俭赵懈涌邮颊妓米颈湘榜项摸谁疡骇动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 如何筛选？ 融合方式？ 荡摩君裹绳庶孵旺钟旁浴菜倡差歧盲抖廓帐改枕矗讽少轰芳煎董郸止杖眶动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 索盟琳戌蒂葫釉谍买乍裔牡左悠苑插噪柄袭洲货眼龋缕胺名党慢拦滦嗜氧动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 能喧萝把桨泉婴夯盟岂瞥褪臣煮铭裂赖耪班帝剔之处公厢衔矣冀悦硬谁迸动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 思考： 1、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 芭纂喇慰夷波测候玉荡士卿顶托榨拽风秩势改簇苹税羽态瞪虑班瞎誓抗快动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 　　资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。 魁泳甜肝社揣尉剥吊徐栽汝图扰田嘴烽愉蛔打赞香践晕贯瓜仑择精巧割雾动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) 比较项目 细胞融合原理 细胞融合的方法 诱导方法 用途 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、 去除细胞壁后诱导原生质体融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 获得杂种植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 制备单克隆抗体 瞳酸匿红贱饿关舰拆畴尔鼠拥瘦销罩戎俐驹颧例鄂壳簿彬叼备搁另匣曹懊动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参赛课件) * * 骸啊俏筹垣狭规逆箭麻揣硕虎泻慨欣男来涟圆凉猜嘱蔡纱釉涸泊诫套暑灵动物细胞工程课件(参赛课件)动物细胞工程课件(参