6种酶的测定--关松荫.docVIP

cellulase 纤维素酶 sucrose invertase 蔗糖转化酶 滴定法 1试剂配制 （1）20%蔗糖 （2）甲苯 （3）PH5.5醋酸盐-磷酸盐缓冲液 （4）33% KI液 （5）H2SO4（1：3） （6）淀粉指示剂：取0.5g淀粉溶于少许水中，加10ml煮沸的25%NaCl液，煮沸1min （7）0.1N Na2S2O3滴定液：配制方法与标定方法见多酚氧化酶测定 （8）菲林溶液：取34.64 g CuSO4.5H2O溶于蒸馏水，并稀释至500ml（a）取173g酒石酸钾钠和50gNaOH溶于蒸馏水，并稀释至500ml（b），使用前将（a）（b）按1：1混合 2操作步骤 取10g土壤置于100ml三角瓶中，用1.5ml甲苯处理15min。加10ml 20%蔗糖和10ml PH5.5醋酸盐-磷酸盐缓冲液，摇匀后放在37℃恒温箱中培养24h 培养结束后，加50ml蒸馏水，摇荡后过滤。取20ml滤液移于100ml三角瓶中，加10ml菲林溶液。在沸水浴上放置10min，冷却至室温后再加3ml 33%KI溶液和4ml H2SO4（1：3）。然后用0.1N Na2S2O3滴定，至终点前加淀粉指示剂，再滴定至蓝色消失。试验应设以水（20ml）代替基质的对照 蔗糖酶活性，用对照与试验的0.1N Na2S2O3滴定毫升数之差表示 β