2.1 微生物的实验室培养 教案 人教版选修1.docVIP

2.1 微生物的实验室培养 教案 人教版选修1 【教学目标】 培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作；测定某种微生物的数量；研究培养基对微生物的选择作用 【教学重点】 微生物培养和无菌技术的操作 【教学难点】 无菌技术的操作 基础知识 二、无菌技术：阅读“无菌技术”（体现在操作环境、操作工具和操作过程三个方面），讨论回答下列问题： (一)获得纯净培养物的关键是 ，具体操作如下： 1．对实验操作的 、操作者的 和 进行 。 2．将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。 3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。 4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。（参考答案：（一）防止外来杂菌的入侵； 1.空间 衣着 手，清洁和消毒 2.器皿 接种用具，培养基，灭菌 3. 酒精灯火焰 4.周围的物品） (二)消毒和灭菌 1．消毒是指 。（不包括芽孢和孢子）常用的方法有 、 、 消毒法。 2．灭菌是指 。常用的方法有： 、 、 灭菌。分别适用于那些用具？ （参考答案：（二）1.是指使用较温和的物理或化学方法仅杀死物体上绝大多数微生物（包括病原微生物和有害微生物的营养细胞，不包括芽孢和孢子） 煮沸消毒法 巴氏消毒发 酒精 2.采用强烈的物理或化学方法使物体内外所有微生物（包括芽孢和孢子）永远丧失其生长繁殖能力的措施 灼烧 干热 高压蒸气） 〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？防止感染实验操作者） 〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？（避免妨碍热空气流通） 〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是 ；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 ，温度为 ，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至 时打开锅盖，其目的是防止 。 【参考答案：有利于锅内温度升高，否则，达不到灭菌所需的实际温度；100k Pa，121℃，15～30，零，容器中的液体暴沸，】 （注：微生物的培养和应用； 一个核心概念：培养基； 两种计数方法：显微镜计数法、菌落计数法； 三种基本技术：无菌技术、倒平板技术、接种技术；） 实验操作----大肠杆菌的纯化培养： 本实验所用的培养基是 ，本实验可分成 和 两个阶段进行。 一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作是： 、 、 、 、 。 （计算→称量→溶化→灭菌→倒平板） 〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？（防止牛肉膏吸收空气中水分。防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。） 〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？（糖、维生素 和有机氮等） 2．倒平板：待培养基冷却至 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是： ①在火焰旁右手拿 ，左手 ；②使锥形瓶的瓶口 ； ③左手将培养皿 ，右手 ，立刻盖上皿盖。④待平板冷却凝固后，将平板 。（参考答案：50，锥形瓶，拔出棉塞，迅速通过火焰，打开一条缝隙，将培养基倒入培养皿，倒过来放置） 〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？（消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基。） 〖思考8〗倒平板的目的是什么？（防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面造成污染。） 〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否