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2.1　植物细胞工程 第3课时 学案人教版选修三 植物体细胞杂交 1．具体过程 第一步：去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。常用方法是“酶解法”，即用纤维素酶和果胶酶等分解细胞壁。 第二步：将两个有活力的原生质体放在一起，通过人工诱导实现原生质体的融合。常用的诱导方法有：物理法和化学法。物理法是利用离心、振动、电刺激等促进原生质体融合。化学法是用聚乙二醇(PEG)等为诱导剂诱导融合。 第三步：将诱导融合得到的杂种细胞，用植物细胞培养的方法进行培育，就可以得到杂种植株。 植物体细胞杂交过程示意图 2．目的 植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞。杂种植株特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 3．优点 克服远缘杂交的不亲和障碍。 【特别提醒】　①植物体细胞杂交过程中无有性生殖细胞的结合，属于无性生殖。 ②从杂种植株的染色体组成上看，染色体数目增加，植物体细胞杂交属于染色体数目的变异。 例3科学家利用细胞工程培育出了“白菜—甘蓝”杂种植株，如图所示，请据图回答下列问题。 (1)图中A、B的制备，需要去除细胞壁，此时要用到________酶和________酶；从本质上讲，“白菜一甘蓝”杂种植株具有的性状是________的结果。 (2)在________的方法下形成C细胞，杂种细胞D生成的标志是形成________；由D形成E的过程称为________，由D→F这项技术的生物学基础是________；由E形成F的过程中细胞的增殖方式为________。 (3)若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是________倍体，若用秋水仙素处理该花粉培养得到的植株，则培育成的植株是________。(填“纯合子”或“杂合子”) (4)“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。 ①取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上，再取等量的、生活状态基本一致的昆虫幼虫放在________植株乙上。 ②适宜条件下培养一段时间后，分别观察昆虫幼虫的生活情况。 ③若________，说明甲植株的抗虫基因没有得到表达；若________，说明甲植株的抗虫基因得到表达。 (5)在大面积种植带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”的同时，间隔种植普通“白菜—甘蓝”或其他蔬菜，供昆虫幼虫取食。这种做法的主要目的是(　　) A．维持“白菜—甘蓝”菜地的物种多样性 B．减缓昆虫幼虫抗性基因频率增加的速度 C．使食虫鸟有虫可食 D．维持菜地生态系统中的能量流动 【尝试解答】　(1)纤维素　果胶　基因选择性表达 (2)人工诱导　新的细胞壁　脱分化(去分化)　细胞全能性　有丝分裂　(3)单　纯合子　(4)①与植株甲长势相似的普通“白菜—甘蓝”　③甲、乙植株上昆虫幼虫正常生活　甲植株上昆虫幼虫死亡，乙植株上昆虫幼虫正常生活(其他合理答案也可)　(5)B 【解析】　此题主要考查了植物体细胞杂交的过程及基因工程的有关内容。(1)去除细胞壁常用酶解法，根据酶的专一性，去除植物细胞壁要用纤维素酶和果胶酶，对于杂种植株性状的表现是基因选择性表达的结果。(2)C细胞的形成需人工诱导，包括物理法和化学法，D细胞形成的标志是再生出新的细胞壁。由D→E是脱分化，由E→F为再分化，上述过程中均进行有丝分裂。(3)花粉离体培养得到单倍体，再经秋水仙素处理后得到纯合的四倍体植株。(4)对于转入的目的基因的检测与鉴定，可以采取是否为转基因的“白菜—甘蓝”植株作为惟一变量构成对照实验，如果目的基因成功表达，应当得到转基因的植株上昆虫幼虫死亡而非转基因的植株上昆虫幼虫存活的结果，如果都存活，说明目的基因未表达。(5)在转基因大田里间隔种植非转基因植株的主要目的是减缓抗性基因频率增加的速度。 【规律方法】　解答有关植物体细胞杂交的有关问题应特别注意以下几点： (1)植物体细胞杂交离不开植物组织培养。 (2)植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞全能性。 (3)植物体细胞融合与植物体细胞杂交结束的标志不同。前者是再生出新的细胞壁，后者是形成杂种植株。 (4)杂种细胞虽然具有两种细胞的遗传物质，但这些遗传物质并不一定都表达。 跟踪训练　如图是植物细胞杂交过程示意图，据图分析回答。