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热处理对放大及量化的转基因和非自然和玉米DNA的影响 Eva Bergerová Zuzana Hrn?írová Monika Stankovská Miroslava Lopa?ovská Peter Siekel Received: 6 May 2009 /Accepted: 2 October 2009 /Published online: 21 October 2009 # Springer Science + Business Media, LLC 2009 关键词：GMO。热治疗，DNA降解，DNA扩增，实时聚合酶链反应 抽象处理植物原料的原因——发生芮妮退化的DNA的食物。DNA的影响退化的放大和量化反式-基因和非转基因DNA在原材料和实验热食品加工过程进行了研究。DNA的程度退化被琼脂糖凝胶电泳检测和聚合酶链反应(PCR)。十六烷基三甲基溴化铵的方法取得更好的DNA质量,而Genespin和向导不太合适。烤在220°C大大减少DNA的大小碎片。为了衡量amplifiable的长度DNA引物对大豆和玉米的基因。小的DNA片段,从100年到200年英国石油公司在所有样品放大。DNA片段超过kbp放大只有加热在220°C持续了不到30分钟。烘烤面粉(220°C)减少提取DNA的大小片段,扩增子不再是1100个基点amplifiable,amplicons 913和1100个基点从烤面包。当PCR分析目标玉米高机动组和玉米蛋白的基因相同的条件下,取得了类似的结果。量化的转基因生物的内容不会受到烤吗 介绍 使用定量聚合酶链基于DNA的方法反应(PCR)开发转基因植物材料(国际组织Standardiza -2005)。申请人的责任是提供方法探测和识别特定的反式-在欧盟形成事件提交授权的社区参考实验室的职责转基因食品和饲料(CRL-GMFF)测试建立和验证所提供的方法。为了为应对越来越多的应用检测和授权,一些新的方法量化转基因生物体(GMOs)最近通过CRL-GMFF也的成员GMO的欧洲网络实验室(阿奎莱拉等艾尔。2008年,2009;Bellocchi et al . 2008;罗斯et al . 2008;?elet al . 2008年)。当前状态和未来的发展最新的分析方法,描述instru -心理状态和标准化的方法综述了转基因生物监测(埃尔南德斯等人2005;Rodrigues-Lazaro et al . 2007年)。由申请人是用于开发的方法植物原料,没有考虑的变化在加工过程分析成分的处理食物引发DNA降解,可能影响食物分析基于DNA cereal-derived食品(Gryson等艾尔。2002年肉类)和植物材料的产品(迈耶et al . 1996年)。烘焙引入限制而闻名大豆的pcr检测小麦面包版(Straub写et al . 1999年)。另一方面,实时PCR已成功用于肉类在高度量化吗加工过的肉类。结果表明,amplicons多达351碱基对比小公司同样适用; 此外,他们有更高的特异性的优势(Hird et al . 2006年)。欧洲议会需要标签的转基因生物的内容在食品,但原始的分析方法开发植物材料只(2001年欧洲,2001)。食物的过程,荷兰国际集团(ing),和与它相关的DNA降解,可能影响分析结果的质量。然后,宣布GMO的内容加工食品可能低估或高估(Berdalholst - jensen 2001),这可能会误导消费者GMO的标签内容是必须的,不是必需的这是不到0.9%的意外和技术不可避免的外加剂。统计上显著的差异量化的转基因原材料之间的内容试制加工食品被发现(饰等al . 2005年)。相反,其他结果显示物理退化的DNA没有影响检测(赫斯特et al . 1999年)和相对量化的转基因的内容(Debode et al . 2007年)。在这个背景下,恩格尔et al .(恩格尔et al . 2006年)要求更多实验表明,无论是食品成分和处理相对quantifi的真实——的影响转基因食品的阳离子。大豆和玉米是最突出的基因修改后的粮食作物(詹姆斯·2008)。食品的检测组件主要是基于典型的识别蛋白质或DNA。蛋白质是温的,一般来说,不适合作为分子分析的目标。的DNA检测和量化的首选方法PCR(Michelini et al . 2008年)。在我们的研究中,发酵大豆和玉米的影响在220°C DNA和转基因DNA的完整性内容的面粉和面包。一个温度220°C一般用于面包烘焙技术。一组引物的设计获得不同大小的amplicons监测DNA降解的能力大豆和玉米和他们的产品。 材料和方法 植物材料大豆(大豆l .美林)、玉米(玉米l .)内核和面粉从当地市场购买布拉迪斯拉发,斯洛伐克共和国。MON 8