紫外可见分光光度计的简单原理.pptVIP

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2017-02-14 发布于天津
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紫外可见分光光度计的简单原理.ppt

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紫外可见分光光度计的简单原理

LAMBERT-BEER定律 A = log — = - log T = e C l = abc吸光度、透过率与浓度的关系（波长、吸收池光程一定）紫外/可见分光光度计的基本结构光源单色器样品室检测器控制放大电路显示器比色皿光电管（或光电池）放大器单色光显示器单光束紫外/可见分光光度计斩光器单色光光电管（或光电池）放大器反光镜双光束紫外/可见分光光度计比色皿光电管（或光电池）斩光器放大器单色光显示器光电管（或光电池）准双光束紫外/可见分光光度计 S1 准直镜切尼尔-特纳 G 单色器结构 S2 准直镜第二篇紫外/可见分光光度测定的一般方法（一）定量分析一、绝对法基于朗伯-比尔定律A = ebC ，当某一物质在一定波长下e（吸收系数，可由已知浓度样品通过测量、计算求得）为一常数，比色皿的光程也是已知，也是一个常数，只要在吸收系数指定的波长处测定样品溶液的吸光度值(OD值)，然后由下式求得该样品溶液的浓度或含量： C = A / e b 二、标准对照法在同样条件下，在选定的波长处，分别测定已知浓度标准溶液的吸光度值A标和样品溶液的吸光度值A样，然后由下式求得样品溶液的浓度或含量： C样 = A样 ? A标 ? C标三、标准曲线法（包括K因数法）最常用的定量分析方法。即在一定波长（λmax）下测定某物质的标准系列溶液的吸光度作校正曲线，然后测定样品溶液的吸光度值，由校正曲线求得样品溶液的浓度或含量。所配置的标准系列溶液的吸光度应在0.1?1.5Abs范围内，吸收测定的精密度可达0.5%。注意：UV/Vis的最低检测浓度与吸收系数、仪器噪声、基线平直度、光谱带宽有关。而最高检测浓度则与吸收系数、仪器的杂散光、光谱带宽等有关，吸收系数与光谱带宽有关。杂散光越小，检测上限越高。四、双波长法标准溶液澄清透明，待测样品浑浊或含有一种与吸收峰临近的干扰成分，对待测成分主吸收波长的吸光度有叠加影响，干扰成分随待测成分浓度变化或无法将干扰成分加入标准溶液中，则必须用双波长法扣除这种干扰成分对待测成分吸光度读