病理形态学实验室.docVIP

病理形态学实验室：　　用光学和电子显微镜技术进行大体、组织、细胞、亚细胞四个层面的病理形态诊断和研究工作。开展并提高与心血管病理相关的组织化学、细胞化学（包括免疫组织和细胞化学、放射性同位素示踪技术等）和形态计量技术在临床病理诊断和研究中的应用。病理室担负日常临床病理检验和诊断以及院内、外有关技术的自主及协作研究项目。子病理学实验室：　　采用最新分子生物学技术对病理标本进行包括致病基因检测，基因诊断，特殊微生物检测，病因学分子诊断，移植细胞增殖、分化、转移、归巢等分子机制，病理环境下组织、器官结构与功能重塑与逆重塑的分子学机制，药理作用的分子学机制等研究。生理学实验室：　　研究心肌收缩功能(心力衰竭的发生机制)，血管舒缩功能(高血压、动脉粥样硬化等)，心、脑、肺损伤保护，药物作用和机制，转基因动物及移植细胞功能等电生理学实验室：　　采用细胞电生理、膜离子通道(膜片钳)和细胞内离子通道(共聚焦显微镜)等生物物理学手段进行心血管病的发生机制和致病基因功能研究。　　具备完成这些工作的各种设备：高压相色谱、膜片钳3台、离体心脏研究装置（Langendorff），血管张力测定设备等能进行心肌细胞电生理及生物电指标测定、心肌细胞离子通道测定、心肌细胞分离、大白鼠及豚鼠脑海马细胞分离及离子通道、全细胞测定；进行离体心肌灌流的心肌保护研究以及心肺灌流及保护的研究；进行心肌张力及各种血管张力的实验研究；进行血浆芬太尼、异丙酚及儿茶酚胺等浓度测定、心肌及肺组织ATP测定，等等。1）进入实验室 （2）不要随意开关验设备 （3）按要求 （4） （5）完成试验后6）值日生打扫实验室-体液调节，呼吸运动的调节，1、小鼠：成熟早、繁殖力强。 2、大鼠：精密的生物工具，常用于科研实验 3、家兔：性情温顺，解剖特点①耳大，表面分布清晰血管 ②支配主动脉弓的减压神经与迷走神经完全分开 4、豚鼠：温顺胆小；耳蜗发达、听觉灵敏但对温度的适应力差 5、两栖类：如蟾蜍—两个心房，只有一个心室 6、犬：内脏结构和比例与人相似，适于慢性实验 （二）常用实验动物的选择： 1、相似性原则：指利用动物与人类某些功能、代谢、结构和疾病特征的相似选择实验动物。如犬——发达的血管和神经系统，适合毒理实验；蟾蜍——反射弧简单、适合电生理实验 2、特殊性原则：指利用不同种系的实验动物存在的机体特殊构造或某些特殊反应，选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的实验动物。如家兔的减压神经单独走向，可观察其对心脏的作用。 3、标准化原则：指动物实验中要选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物。标准化动物指经遗传学、微生物学、环境及营养控制的标准化实验动物，与实验条件、实验技术、药品试剂等相匹配。一般用于科研。但教学实验对动物的年龄、体重、健康状况都有一定要求。 4、经济性原则：指尽量选择容易获得、价格便宜和饲养经济的实验动物。 （三）动物实验的方法： 1、复制动物模型法：最基本的方法，用于研究疾病的发生、发展及防治方法。 2、在体及离体器官实验：生理实验的常用方法。在体实验是在麻醉情况下对分离暴露的器官或组织进行研究，或观察动物整体或局部给药后对其暴露的器官或组织的影响。离体实验是利用动物的离体组织、器官，给予一些在体情况下无法实施的手段，观察其各项指标的变化。 3、仪器检测和生化测定法：观察电生理或测定体液 4、免疫学观察法 5、其他方法 三、动物实验的基本操作技术： (一)实验动物的准备、麻醉和固定 1、实验动物的准备：实验前12小时禁食，不禁水 2、实验动物的麻醉： ⑴麻醉药选择及用法 原则：麻醉完善、对动物毒性小、对所研究的机能影响小、使用方便 药物： ①乙醚：适用于狗、猫、兔，有挥发性，也可用于小白鼠的吸入麻醉（小脑受伤动物运动的观察） ②氨基甲酸乙酯：又名乌拉坦，常用于家兔的急性实验 ③戊巴比妥钠：对狗和鼠类的麻醉效果好 ⑵常用动物的麻醉方法： 静脉麻醉（家兔）：①先称重动物体重，再按所需剂量抽取药液。②拔掉兔耳缘静脉部位的兔毛③用左手食指和中指夹住耳缘静脉近心端，阻断血流④再用左手拇指和无名指固定兔耳，右手持注射器将针头顺静脉回流方向刺入静脉内 左手拇指和食指夹持固定针头，右手缓慢将药注入（注意：注射应从静脉的远心端开始） ⑶麻醉深度的判断： ①呼吸：呼吸加快或不规则转为规则平稳 ②反射活动：角膜反射迟钝 ③肌肉张力：全身肌肉松弛 ④皮肤夹捏反应：用止血钳夹捏动物皮肤，反应消失（主要判断标准） ⑷使用麻醉药的注意事项： ①合理应用麻醉药的种类及剂量 ②静脉麻醉时注射速度应慢 ③在整个麻醉过程中，必须密切注意动物状况 ④麻醉过浅适当加量，麻醉过深及时抢救 3、常用机能实验动物给药方法 经口给药、灌胃、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射 4、常用动物的捕捉 ⑴蟾蜍：直