5 离心分离专用课件.pptVIP

* 5 离心分离 * 5.1概念 对于浓度较小，粒径较大，硬度较强的不溶物，可以采用过滤分离。 但当固体颗粒细小而难以过滤时，发酵液不易被过滤纯化，离心操作往显得十分有效。 离心分离：借助离心机旋转所产生的离心力，使不同大小和不同密度的物质分离的技术 离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。 动植物细胞的收集、细胞碎片和沉淀的分离等常用离心分离。 * 优点： 分离速度快， 分离效率高、 液相澄清度好； 缺点： 与过滤设备相比，设备投资高、 能耗大、 离心产生的固体浓缩物和过滤产生的浓缩不同。 通常情况下离心只能得到一种较为浓缩的悬浮液或浆体。而过滤可获得的水分含量较低的滤饼。 5.2 离心分离的特点 * 5.3离心作用的大小1.颗粒沉降速度 d － 颗粒直径；ρp （rho）－ 颗粒密度； ρm －溶液密度； η（eta） － 液体介质粘度；ω －旋转角速度；r －转轴中心到颗粒中心距离。 提高旋转角速度，加长转轴中心到颗粒中心距离（ω2r）可提高沉降速度。 与颗粒直径有关，大颗粒容易沉降。 与颗粒密度和溶液密度之差(ρp-ρm)成正比，随溶液粘度增大而减小。 * 2.离心力(Centrifugal force)： 物体作圆周运动而产生向心力的反作用力 F = m x a a是旋转角速度，a=ω2r，ω是角速度，r是半径；m是物体质量。 * 按速度或离心力： 1、常速离心机 最大转速8000rpm(r/min),相对离心力(RCF)104g以下,用于细胞、菌体和培养基残渣等分离； 2、高速（冷冻）离心机 1×104-2.5×104rpm，相对离心力104-105g,用于细胞碎片、较大细胞器、大分子沉淀物等分离； 3、超速离心机 转速2.5-8×104rpm，相对离心力5*105g；用于DNA、RNA蛋白质、细胞器、病毒分离纯化；检测纯度；沉降系数和相对分子量测定等。 5.4 离心机的种类与用途 对于常速和高速离心机，由于所分离的颗粒大小和密度相差较大，只要选择好离心速度和时间，就能达到分离效果。 超速离心的离心方法有：差速离心、密度梯度离心和等密度梯度离心。 * 按离心机的作用方式： 斜角式 平抛式 管式 蝶式 螺旋式 多室 * 1）斜角式离心机 是一类结构最简单的实验室常用离心机， 指离心管腔与转轴成一定倾角的转子； 角度越大，沉降越结实，分离效果越好， 角度越小，颗粒沉降距离短，沉降速度快，但分离效果差。 颗粒在离心管中沉降时， 先沿离心力方向撞向离心管， 然后再沿管壁滑向管底， 因此管的一侧会出现颗粒沉积。 * 斜角式离心机的特点 结构稳定， 可装载较多的样品 使用较高的转速。 加速或减速时，对样品有搅动。 有些梯度离心要求用角转头，否则形成的梯度不均一，线性很差． * 2）平抛式离心机 平抛式离心机：结构简单的实验室常用的低中速离心机，转速一般在 3000-6000rpm。 转子活动管内的离心管，静止时垂直挂在转头上，旋转时随着转子转动，从垂直悬吊上升到水平位置（约200—800rpm）。 颗粒在水平转子中的沉降是沿管子轴向移动。 样品容易收集 受振动和变速搅乱后对流现象小， 但转头结构复杂，最高转速相对低 容量也小一些。  * 平抛式离心机转子 * ３）管式离心机 （tubular-bowl centrifuge） 液-液分离，固-液分离两种 管式离心机具有一个细长而高速旋转的转鼓， 转鼓内装有纵向平板， 其下部有进料口。上部两侧有重液相和轻液相出口。 * 管式离心机 待处理的物料在一定压力（3×104 Pa左右）下由进料管经底部空心轴进入鼓内， 转鼓带料液高速旋转，在离心力下，悬浮液沿转鼓内壁向上流动，料液在离心力场的作用下因其密度差的存在而分离。 澄清后的液相流动到转鼓上部的排液口排出。 比重大的固体微粒逐渐沉积在转鼓内壁形成 沉渣层，达到一定数量后，停机人工清除。 * 管式离心机特点： 结构简单， 可提供较大离心力，转速高，分离因数高达15000-65000。 管状离心机可以冷却，有利蛋白质分离 间歇操作，须定时拆卸、清洗 适用于分离乳浊液及含细颗粒的稀悬浮液，适用于固含量低于1%，颗粒度小于5微米，黏度大的悬浮液或固液两相密度差较小的悬浮液 * 4）碟片式离心机disk-bowl centrifuge 是在管式离心机的基础上发展起来的，在转鼓中加入了许多重迭的碟片，缩短了颗粒的沉降距离，提高了分离效率。 有一个密封的转鼓，内装十至上百个锥顶角为60~100゜锥形碟片。 碟片间的距离一般为0.5-2.5mm, 是生物工业中应用最为广泛的一种离心机 * 碟片式离心机工作原理 当悬浮液从料液管流入高速旋转的