硒加抗癌药对人肝癌细胞生长的影响.doc

硒加抗癌药对人肝癌细胞生长的影响 刘 耳 吴 燕 张宝初 （江苏省启东肝癌防治研究所 启东 226200） 摘要：研究亚硒酸钠（Na2SeO3）和丝裂霉素（MMC）、盐酸阿霉素（ADM）对QGY—7703人肝癌细胞生长的影响．结果表明：终浓度为1μg/ml的Na2SeO3可明显抑制肝癌细胞的生长增殖、减少细胞对甲胎蛋白（AFP）的分泌；1μg/ml的 Na2SeO3与 1.5μg/ml的MMC或 15μg/ml的 ADM联合应用对肝癌细胞生长增殖的抑制作用，不论是细胞生长的抑制率、还是肝癌细胞分泌 AFP的抑制率，均明显高于各自的单独应用效果，差异有显著性意义（P0.05）．并随着培养时间的延长，抑制程度持续增强。提示Na2SeO3与抗癌药联合应用，具有良好的协同或相加抑癌、抗癌效应．对临床应用有一定的实际意义． 关键词 亚硒酸钠 丝裂霉素 盐酸阿霉素 人肝癌细胞 效应 硒是一种非金属物质，是人类不可缺少而又不可过量的必需微量元素，有关硒与肿瘤的研究报道颇多，多数认为机体内硒水平与肿瘤发生密切相关、硒有预防肿瘤的作用［1-4］。本文则研究亚硒酸钠（简称Se）加抗癌药物丝裂霉素（MMC）、盐酸阿霉素（ADM）对QGY—7703人肝癌细胞株生长的影响，结果证实，Se加抗癌药对抑制肝癌细胞的生长具有协同或相加效应。  材料和方法 1 材料 人肝癌细胞株QGY－77O3由王氏等建株。RPMI一1640培养基为美国GIBCO产品。新生牛血清为杭州市四季青生物工程材料研究所生产。亚硒酸钠为上海试剂一厂生产。MMC为日本协和发酵工业株式会社产品。ADM为日本明治制药株式会社与汕头鱼它滨制药厂生产。 2 方法 2.1 QGY一7703人肝癌细胞的培养： 取对数生长期的QGY一7703人肝癌细胞，以含20％新生牛血清的RPMI一1640培养液配制成20000／ml的单细胞悬液，按 lml／孔量接种于 24孔培养板．置5％CO２。孵箱中37 ℃恒温培养。 2．2 分组： 本实验分为加 Se组、MMC 组、Se＋MMC组、ＡDM组、Se＋ADM 组和对照组．共计6组。实验组中Se的最终浓度为１μg／ml，MMC含量为1.5μg／ml，ADM含量为15μg／ml从见附表。   附表 实 验 分 组 组 别 药 物 Na2SeO3μg／ml MMCμg／ml ADMμg／ml 加Se组 MMC组 Se+MMC组 ADM组 Se+MMC组 对照组 １ － １ － １ － － 1.5 1.5 － － － － － － 15 15 － 3 观在指际 3．l 细胞生长抑制率（IR）：各组细胞均培养３天，每天每组分别取３孔细胞，以血球计数板计算出细胞总数，以台盼染色计数拒染细胞．并以3孔的平均数值绘制出实验刎胞生长抑制率曲线。 对照组活细胞数－实验组活细胞数 对照组活细胞数3.2 甲种胎儿蛋白（ＡＦＰ）检测 将ＡＤＭ各组细胞培养３天，每天每组分别收集３孔细胞培养上清液，冻存于－20℃冰箱；应用北京原子能研究所生产的放射免疫试剂盒统一测定培养上清液中的ＡＦＰ含量，并以３孔的平均值计算出细胞分泌ＡＦＰ的抑制率（与对照组比较）。 结果１ 各单项实验组对QGY—7703 肝癌细胞生长的影响 在培养液中分别加入终浓度１μg／ml的Se、1.5μg／ml的MMC或15μg／ml的ADM，结果表明各实验组均显著抑制人肝癌细胞的生长，活细胞数显著低于空白对照组，并且随着培养时间的延长，对癌细胞生长的抑制程度持续增强。与对照组相比，各组抑制率 （第3天时加硒组为59％，MMC组为82％，ADM组为91％）均有显著性差异（P0.05）2 Se和抗癌药合作对QGY—7703人肝癌细胞生长的影响 结果表明，用Se或MMC、ADM的地处理的人肝癌细胞生长都受到明显抑制，但在Se和抗癌药联合应用时，对物细胞生长的抑制程度均显著高于同等剂量的相应实验组，Se＋ADM组抑制率为 89％，Se＋ADM组达100％，差异有显著性意义（P0.05）。显示了Se和抗癌药物的协同抗癌效应。 3 不同实验组对QGY一7703人肝癌细胞分泌AFP的影响 我们测定了ADM实验组与加