细胞信号转导在肾间质纤维化中作用的新进展.doc

细胞信号转导在肾间质纤维化中作用的新进展 中山大学附属第一医院肾内科，教育部肾脏病重点实验室 余学清 杨琼琼 大量临床和实验研究表明，在各种原发和继发性肾小球疾病中，肾小管间质病变的严重程度是反映肾功能恶化严重程度和判断预后最重要的指标之一。但有关肾小管间质纤维化的机制尚未阐明。转化生长因子β（Transforming growth factorβ，TGF-β）是一种复杂的多功能细胞因子，在多种器官的纤维化过程中发挥重要作用。近年研究表明TGF-β主要通过其信号蛋白调控复杂的生物学效应。 细胞信号转导是近年来生命科学领域里最重要的成就之一，细胞中存在一个能对外来信号起反应的高度完善的细胞信号转导系统。这个系统的存在使细胞能够接受、汇集、分析并整理来自细胞外的各种信号，并做出最有利于细胞生存发展和实现其各种功能的反应。已有的研究发现，TGF-β对细胞功能的调节相当复杂，Smads蛋白、G蛋白、MAPKS、NF-kB等都参与其信号转导途径，且这些途径相互作用，形成“对话（Cross talk）”，对疾病发展起共同调节作用。其中TGF-β/Smads信号蛋白系统在TGF-β的生物学作用中发挥重要作用。 一、Smads蛋白的分类、结构和功能 当TGF-β配体分子与细胞膜上的丝氨酸/苏氨酸激酶受体结合后，诱导TGF-βⅠ型(TβRI)和Ⅱ型(TβRⅡ)受体低聚反应，形成两个Ⅰ型和两个Ⅱ型受体的异聚体，并活化下游胞浆蛋白Smads，形成不同的、有活性的转录复合物，转移入核后，调节不同靶基因的转录。 最早的Smad蛋白是Sekelsky等在果蝇属的基因筛选中发现了可补救dpp缺失突变的分子，称为Mad(mothers against dpp)，接着在美丽新杆小线虫克隆出Mad相关基因sma-2, sma-3, sma-4，它们是Mad的同源物，可形成复合物协同发挥作用，遂将Mad与Sma组合统一命名为Smad。目前脊椎动物中发现有8种，即 Smad1、2、3、4、5、6、7、8。根据Smads蛋白家族结构和功能特点，将其分为三类：①受体激活Smad（R-Smads），可直接被TβRI磷酸化，主要有Smad1、2、3、5、8，其羧基末端具有保守的丝氨酸-丝氨酸-任意氨基酸-丝氨酸（SSXS）基序，Smad1,?5,?8介导骨形态生成蛋白（BMP）下游的信号转导，Smad2、3参与TGF-β和激活素（activin）的信号转导；②共同介质Smads (Co-Smads)是不同通路共用的信号分子，目前脊椎动物发现的有Smad4/DPC4；③抑制性Smads (I-Smads)反馈调节其他2类Smads的生物学功能，主要有Smad6、7，二者可与活化的TβRI结合，从而抑制R-Smads磷酸化，发挥反馈调节作用。 研究发现Smads蛋白具有诸多同源序列组成两个结构域：氨基末端的Mad同源1（MH1）区和羧基末端的MH2区，所有的Smads都有的MH2区， MH1与MH2区之间有富含脯氨酸的绞链区。在R-Smads中，MH2结构域往往含有SSXS基序。这些结构域在信号转导中具有不同的作用，其中MH2是效应区域，Smads通过MH2与受体作用，当受体被激活后，MH2的SSXS基序中的丝氨酸被磷酸化，Smads被激活，激活后的Smad2通过其MH2结构域与Smad4相互作用，形成异三聚体，并且Smads也是通过MH2与转录因子相互作用的。MH1结构域也可直接与DNA结合调节转录。Smad2是通过Smad锚定蛋白（Smad anchor for receptor activation，SARA）与Ⅰ型受体发生作用的。SARA是含有FVVE(苯丙氨酸-酪氨酸-缬氨酸-谷氨酸)结构域的蛋白质，其FVVE结构域可使SARA移至细胞膜上, SARA通过位于FVVE结构域下游的由85个氨基酸组成的Smad结合域(Smad binding elements, SBE)与Smad2结合，募集未磷酸化的Smad2至细胞的特定位置，与Ⅰ型受体发生作用。当信号启动后，Ⅰ型受体使Smad2磷酸化，磷酸化的Smad2脱离SARA及受体复合物，与Smad4形成寡聚体，失去Smad2的SARA又可以募集别的Smad2。而Co-Smads 和I-Smads 没有SSXS基序，不能被TβRI磷酸化。 I-Smads具有与其他Smads相类似的MH2结构域，但其MH1结构域却与其他的Smad不同，它们对TGF-β、激活素、BMP的信号转导具有抑制作用, Smad6/7可以与Ⅰ型受体结合，但不能被磷酸化，也不能与Ⅰ型受体脱离，但可以抑制Smad2磷酸化，当Smad1被BMPⅠ型受体激活后，其磷酸化的过程也被Smad6所抑制；另一方面磷酸化的Smad2可以与Smad4形成异三聚