s第五章生物氧化1讲义.ppt

名词术语 呼吸电子传递链（respiratory electron-transport chain）：　　由一系列可作为电子载体的酶复合体和辅助因子构成，可将来自还原型辅酶或底物的电子传递给有氧代谢的最终电子受体分子氧（O2）。 氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)：　　电子从一个底物传递给分子氧的氧化与酶催化的由ADP和Pi生成ATP的磷酸化相偶联的过程。 化学渗透理论(chemiosmotic theory)：　　一种学说，主要论点是底物氧化期间建立的质子浓度梯度提供了驱动由ADP和Pi形成ATP的能量。 P/O比(P/O ratio)：　　在氧化磷酸化中，每1/2O2被还原时形成的ATP的摩尔数。电子从NADH传递给O2时，P/O比为3，而电子从FADH2传递给O2时，P/O比为2。 高能化合物(high energy compound)：　　在标准条件下水解时自由能大幅度减少的化合物。一般是指水解释放的能量能驱动ADP磷酸化合成ATP的化合物。 思考题 三羧酸循环没有氧参与，为何被称为“有氧氧化”？ 细胞中的NADH是如何氧化的，有哪些不同的方式？ 1、称取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500μg酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1μg酪氨酸的酶量，请计算：（1）酶溶液的蛋白浓度及比活力。（2）每克纯酶制剂的总蛋白含量及总活力。 2、?对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当[S]=Km时，若V=35μmol/min，Vmax是多少μmol/min？当[S]=2×10-5mol/L，V= 40 μmol/min，这个酶的Km是多少？ 3、某酶的初提取液经过一次纯化后，竟测定得到下列数据：试计算比活力、百分产量及纯化倍数。? ? ? ? ? 体积/ml? ? ? ? 活力单位/（U/ml）? ? ? ? 蛋白质/（mg/ml）初提取液? ?? ?? ?? ?? ? 120? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?200? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ???10（NH4）2SO4盐析? ? ? ?? ?5? ? ? ?? ?? ?? ???810? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?4.5 4、从肝细胞中提取某蛋白酶的粗提液300mL，含有150mg蛋白质，总活力是360U。经过几步纯化后得到4mL酶制品，含有0.08mg蛋白质，总活力是288U。问整个纯化过程的回收率是多少？纯化倍数是多少？ 5、在一组10ml的反应体系中，加入不同浓度的底物，分别测定反应初速度，得数据如下： [s]mol/L v(μmol/min) 5.0×10-7 0.0096 5.0×10-6 0.071 5.0×10-5 0.20 5.0×10-4 0.25 5.0×10-3 0.25 5.0×10-2 0.25 不作图计算：（１）Ｖmax和Km。 （２）计算[S]=1.0×10-6mol/L和[S]=1.0×10-1mol/L时的Ｖ。 （３）假如每一个反应体系中酶浓度增加至４倍时, KmＶmax是多少？当[S]=5.0×10-5mol/L时，Ｖ是多少？ * * * * （二） FADH2 呼吸链 电子的传递是由FADH2传给铁硫中心，然后再传给辅酶Q 由辅酶Q到O2之间的电子传递与NADH呼吸链完全相同 FADH2 FADH2是在三羧循环中由琥珀酸氧化成延胡索酸时形成。 琥珀酸脱氢酶的辅基是黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。 动物体内磷酸甘油脱氢酶和脂酰CoA脱氢酶的辅基也是FAD。 电子传递链的排列顺序 从NADH和FADH2到O2之间的电子传递体在呼吸链中的排列顺序是按照它们的还原电势大小排成的 这个序列与它们对电子亲和力的不断增加顺序相吻合 2 O 细胞色素 c NADH - Q NADH QH c 还原酶 细胞色素 FMN FeS Cytb Cytc 琥珀酸 还原酶 Q - 琥珀酸 FeS FMN CoQ 10 - c 氧化酶 Cytc Cyt a a 3 + Cu 2+ 1 三、胞液中NADH的氧化 胞液中的NADH不能通过线粒体