腺病毒载体的研究进展.doc

腺病毒载体的研究进展 高骞 生物科学基地班 2009113051 腺病毒载体的研究进展 高骞 （西北大学生命科学学院，西安，710069） 摘要：腺病毒因具有易感染性、宿主范围广、毒性低、使用安全、容纳量大、非整合性等特点，使得腺病毒载体成为基因转移中最有前途的基因载体之一。但由于腺病毒载体在体内靶向性差、免疫原性强、半衰期短，限制了其在基因治疗中的作用。为解决上述问题，可对腺病毒载体的衣壳蛋白进行遗传改造或表面修饰。本文对腺病毒及腺病毒载体的研究进展做一简要综述，为进一步优化和改良腺病毒载体提供参考。 关键词：腺病毒；腺病毒载体；研究进展 Advances in adenovirus vectors Abstract: Adenovirus has a variety of merits: a vulnerability, a wide host range, a low toxity, a use of safety and non-integrity, which made adenovirus vectors become one of the most promising gene vector in the gene transfer. However, due to its poor targeting, strong immunogenicity and short half-life, limit its role in gene therapy. To resolve these problems metioned above, the capsid protein of adenovirus vectors can be operated for genetic or surface modification. The article bridfly reviewed recent progress in adenovirus and adenovirus vectors in a bid to offer references for further optimizing and improving adenovirus vectors. Keywords: adenovirus; adenovirus vectors; research progress 1953年，Rowe等从人的扁桃体组织中分离到一种病毒，后来人们又陆续从人和其他哺乳动物及禽类中分离到类似病毒。因为该病毒最初是从腺体组织中分离的，故名为腺病毒（adenovirus，Ad）2个属，即哺乳动物腺病毒属和禽类腺病毒属，分别感染哺乳动物和鸟类。迄今总共已发现有80多个血清型的腺病毒，其中已鉴定过的人腺病毒有50多个型。天然情况下，腺病毒可感染人的呼吸道、胃肠道、尿道、膀胱、眼、肝脏等部位。感染人腺病毒可分为A、B、C、D4C组血清2型（Ad2）和5型（Ad5）E1区，可引起人呼吸道轻微感染，但不引发肿瘤。相比于其它病毒载体，腺病毒转导效率高，宿主范围广，可同时感染增殖性和非增殖性细胞，包装大量外源基因，易于制备纯化成高滴度的临床应用产品。2004年，重组人p53腺病毒注射液（今又生）在我国获批上市，成为全球首个获准上市的基因治疗药品。截止2011年3月[1]，已进入临床的1644项抗肿瘤基因治疗试验中，应用腺病毒作为基因载体的试验数量最多，达23.8%。 腺病毒的结构特征 腺病毒无囊膜，直径约70-90nm，呈二十面体立体对称[2]。腺病毒含有一个大小在36kb左右线形双链DNA分子（Ad-DNA），两端具有末端反向重复序列（inverted terminal repeat，ITR）Ad-DNA）变性后，在复性条件下会产生单链的柄-环结构。病毒衣壳有252个壳粒，其中240个壳粒各自与周围6个壳粒相邻，称为六邻体（hexon）。在病毒二十面体的12个顶角上，各有一个顶角壳粒，因它与周围的5个壳粒相邻，被称为五邻体（penton）。从每个顶角壳粒的基底部向外伸出一根纤维蛋白突起（fibre protruding），其C末端形成的结节（knob）可与细胞表面的病毒受体结合，介导病毒与细胞的识别与粘附过程。除了上述3种主要蛋白以外，还有一些辅助性小蛋白如pⅣ、pⅧ、pⅨ、pⅢ、pⅣa2 图1.腺病毒的衣壳结构 2. 腺病毒的感染机理 病毒感染周期传统上分为两个阶段，第一阶段始于病毒与宿主细胞的相互作用：侵入细胞，运载病毒基因组到达细胞核；第二阶段是病毒基因的复制、转