17Northern杂交与斑点杂交讲解.ppt

第17讲 核酸杂交技术 Northern杂交与斑点杂交 温故知新 我们一起回顾上节课所学的Southern杂交： 一、DNA的变性 二、DNA的复性 三、核酸分子杂交技术 四、Southern杂交的原理和主要步骤 一、Northern杂交的由来 二、Northern杂交的用途 三、Northern杂交的基本流程 四、Northern杂交的优点和缺点 五、Northern杂交、Southern杂交和Western杂交的区别 六、斑点印迹杂交的原理 七、斑点印迹杂交的基本流程 八、课堂小结 九、作业 一、Northern杂交的由来 Northern杂交由斯坦福大学的George Stark教授于1975年发明。其原理是在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。 之所以命名为Northern杂交是因为其原理与Edwin Mellor Southern教授发明的southern杂交原理相似，实验过程也相似，所以取了一个类似的名字叫Northern杂交。 二、Northern杂交的用途 1、检测外源基因在宿主中能否转录。 2、检测mRNA长度分子量大小，提供有关RNA完整性信息和不同的剪接信息。（依电泳迁移率估计）； 3、mRNA