b第四章基因工程的常规技术上.pptVIP

３. Northern杂交 1979年，J. C. A1wine等人发展出了一种新的方法。 同Southern的DNA印迹杂交技术十分类似，所以叫做Northern杂交技术(Northern blotting)。为鉴别RNA的杂交技术。 Northern杂交的定义是：将RNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素滤膜或其它化学修饰的活性滤纸上，进行核酸杂交的一种实验方法。 4. Western杂交 为鉴别蛋白质的杂交技术。 蛋白质用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，将蛋白质从凝胶转移到一固相支持物上（如醋酸纤维素膜、PVDF膜），通过抗体与附着于固相的蛋白质所呈现的抗原抗体反应来对蛋白质进行检测。 转膜 4. Western杂交 Western杂交显像图片 5. 菌落原位杂交 对菌落中DNA进行原位鉴定 三、PCR技术 1. PCR技术的发现 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）方法始于20世纪70年代早期，有Khorana与其同事提出建议，作为一种降低化学合成基因工作量的策略。 其想法被遗忘，在1985年Kary Mullis及其Cetus公司的同事们，首次用大肠杆菌DNA 聚合酶I的Klenow片段体外扩增出哺乳动物基因片段。他们因此获得1993年诺贝尔生理学和医学奖。 但在发现耐热的Taq酶之前，PCR还不是成熟的技术。多种耐热聚合酶的发现，