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遗传物质的分子基础
第二章 遗传物质的分子基础
一、DNA作为主要遗传物质的证据
分子遗传学的大量直接和间接的证据,说明DNA是主要的遗传物质,而在缺乏DNA的某些病毒等中,RNA就是遗传物质
1、间接证据
从DNA含量、代谢、结构、染色体共有等方面均能间接证明遗传物质是DNA而不是其他物质
2、直接证据
(1)细菌的转化
肺炎双球菌两种类型:
光滑型(S型): SI 、SII 、 SIII
粗糙型(R型): RI 、RII 、RIII
1928, Griffith首次将R II → S III ,实现了细菌遗传性状的定向转化 。被加热杀死的S III 型肺炎双球菌必然含有某种促成这一转变的活性物质
肺炎双球菌的转化实验,强调生物实验设计的严谨性、周密性
1944 ,Avery等用生物化学方法证明这种活性物质是DNA,该提取物不受蛋白酶、多糖酶和核糖核酸酶的影响,而只能为DNA酶所破坏
(2)噬菌体的侵染与繁殖
1952, Hershey等用同位素32P和35S分别标记T2噬菌体的DNA与蛋白质
赫尔歇的噬菌体实验,同样强调生物实验设计的严谨性、周密性
(3)烟草花叶病毒的感染和繁殖
1956, Frankel-Conrat,Singer 的实验:
RNA接种到烟叶 → 发病
RNA
RNA酶处理RNA → 不发病
TMV
蛋白质:接种后不形成新的TMV → 不发病
说明在不含DNA的TMV中RNA就是遗传物质
为了进一步论证上述的结论,Frankel-Conrat和Singer实验
生物实验设计的严谨性、周密性
二、核酸的化学结构
核酸的构成单元是核苷酸,是核苷酸的多聚体
每个核苷酸包括三部分: 五碳糖、磷酸、碱基
两个核苷酸之间由3’和5’位的磷酸二脂键相连
两种核酸的主要区别:
DNA:脱氧核糖,A、C、G、T,双链,分子链较长
RNA:核糖,A、C、G、U,单链,分子链较短
1、DNA的分子结构
1949-1951,Chargaff对多种生物来源的DNA的碱基成分的精密分析,发现DNA中:
A=T,G=C,A+G=C+T
说明碱基A与T之间、G与C之间存在互补配对关系,称为查尔格佛法则(Chargaff’s rule)
1953,Watson和Crick根据:查尔格佛法则(碱基互补配对的规律)和对DNA分子的X射线衍射结果,提出了著名的DNA分子双螺旋结构模型。这个模型已为以后拍摄的电镜直观形象所证实
DNA分子模型最主要特点:
(1) 两条多核苷酸链以右手螺旋的形式,以一定的空间距离,环绕于同一轴相互盘旋而成
(2) 反向平行:5’-3’,3’-5’
(3) 两条单链间以碱基间氢键配对相连: A T,C G
(4) 每个螺旋34? (3.4nm),含10bp,直径约为20?
(5) 分子表面大沟和小沟交替出现
用北京中关村的“DNA雕塑”、牵牛花的攀缘习性来形象说明
A-T和C-G两种核苷酸对分子链内排列的位置和方向只有四种形式:
A---T C---G A---T G---C
C---G A---T G---C A---T
?假设某一段DNA分子链有1000bp,则该段就可以有41000种不同的排列组合形式,反映出来的就是41000种不同性质的基因
2、RNA的分子结构
绝大部分RNA以单链形式存在,但可折叠起来形成若干双链区域。这些区域内,互补的碱基对间可形成氢键
一些以RNA为遗传物质的动物病毒含有双链RNA
三、DNA的复制
1、DNA复制的一般特点
(1)复制方式:半保留复制
(2)复制起点:原核生物一般只有一个复制起点 ,一个复制子 ;真核生物是多起点的, 多个复制子
(3)复制方向:一般为双向复制
(4)具有复制的忠实性
2、原核生物DNA合成
(1)酶系统:DNA聚合酶、连接酶、解旋酶、拓扑异构酶等
(2)半保留复制,双向复制
(3)有引物的引导,为RNA
(4)延伸方向为5’-3’
(5)一条链一直从5’向3’方向延伸,称前导链,连续合成;另一条先沿5’-3’ 合成冈崎片段,再由连接酶连起来链,后随链,不连续合成
在前导链上,DNA引物酶只在起始点合成一次引物RNA,DNA聚合酶III开始DNA的合成* 在后随链上,每个冈崎片段的合成都需要先合成一段引物RNA,然后DNA聚合酶III才能进行DNA的合成
3、真核生物DNA合成
重点是真核生物DNA的复制与原核生物的主要不同点:
(1)DNA的合成只是在
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