消毒灭菌.pptVIP

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消毒灭菌

细菌的培养与分离技术 培养基 常用玻璃器材的准备 培养基的成分和作用 培养基的种类 培养基的制备 细菌的接种与培养 无菌技术 细菌检验的操作需在无菌室或超净工作台内进行。 无菌室、超净工作台使用前后需进行消毒。 细菌检验使用的物品使用前后需严格灭菌 标本的采集 无菌试管、平皿的使用 细菌接种的基本程序 细菌接种法 平板划线接种法: ★目的:使混合的细菌呈单个分散生长,形成单个菌落,以便获得纯菌。 ★方法: ★分区划线法:适用于含菌量较多的标本 ★连续划线法:适用于含菌量较少的标本 液体培养基接种法 穿刺接种法 :用于观察细菌动力 斜面接种法 倾注培养法:用于细菌计数 分区划线法: 本次试验要求同学首先掌握细菌分离培养的平板划线接种法。 注意:在每次划线前要烧灼接种环,以杀灭环上留剩的菌液。 图2-3 分区划线法示意图 ? 三段分区法 四段分区法 五段分区法 分区划线法(3区) 连续划线法 细菌培养法 一般培养(需氧培养): ★培养温度:37℃(采用恒温培养箱) ★培养时间:18~24h 斜面接种法及接种后菌落生长示意图 取菌的方法 【实验结果观察记录】 细菌生长情况的观察 观察琼脂平板表面生长的各种菌落,注意其大小、形 状、边缘、表面结构、透明度、颜色等性状。 细菌在固体培养基中的生长现象 菌落 ★定义:指单个细菌在平板培养基上生长繁殖,形成单一肉眼可见的细菌集团。 ★菌落特征:大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性 ★菌落类型:光滑型(S)、粗糙型(R)、黏液型(M) 菌苔:指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。 菌落的三个类型: 1.光滑型菌落(Smooth type Colony) :又称S型 2.粗糙型菌落(Rough type Colony):又称R型 3.粘液型菌落(Mucoid type Colony)又称M型 细菌在液体培养基中的生长现象 混浊 沉淀:多见于链状排列的细菌 菌膜:多见于厌氧菌 细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌:只沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。 菌 落 菌落与菌苔 液体培养时的群体形态: 细菌在液体培养基中的生长现象 细菌在半固体培养基中的生长现象 * * 灭菌接种环 沾取标本 接种 灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌,以免污染标本 杀灭接种环沾染的细菌,以免污染环境 孵育后情况 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 接种后菌落生长示意图菌苔(lawn) 菌落(S型) culture plate 菌落(R型) 单菌落(clone) 菌落(R型) 菌苔(lawn) 细菌的群体形态

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