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动物营养研究方法与实验技术 赵胜军 博士 2010.4.15 第六章 消化实验 第一节 消化试验概述 一、消化试验概念、目的与种类 1、概念 以测定动物对饲料养分的消化能力或饲料养分的可消化性为目的的试验 2、目的 准确地量化饲料中各种养分被动物消化利用的程度 ,也是评定饲料营养价值的重要方法 3、种类 第二节 体内消化试验 一、全消化道消化试验 全收粪法 指示剂法 1、全收粪法 优点 试验操作方便、测定较准确 缺点 排泄物污染严重 采食量、排泻量难以准确记录 食糜中养分含量受环境影响大 工作量大 2、指示剂法 优点 在于减少收集全部粪便带来的麻烦,省时省力,尤其是在收集全部粪便较困难时 缺点 指示剂回收率对消化率影响较大,并且很难找到回收率很理想的指示物质 分析困难,较难获得重复性高的测定数据 工作量大 对指示剂的要求 不能被动物消化吸收 在饲料中、粪便中能均匀分布 有很高的回收率 对动物没有毒副作用 易于检测 种类 外源指示剂 饲料本身不含,人为加入饲料中的指示物质 一般多用Cr2O3, EDTACo 内源指示剂 饲料本身含有,不能被动物消化吸收但可以测定的成分 多用酸性不容灰分(AIA acid insoluble ash)[2mol 或4mol HCl 不溶] 二、消化道不同位点消化试验 不同位点瘘管安装 1、屠宰法 在饲喂某一日粮一定时间后,将动物“屠宰”,于距回盲瓣一定距离处取样 优点 该方法不受日粮种类限制,试期短,采样时动物消化道干扰小,且可在几个不同点取样 缺点 不易取得代表性的样本,不能重复操作 由于食糜通过小肠是间歇性的,所以在任一时间,回肠末端仅有少量食糜 动物死后,黏膜细胞很快脱落进入肠腔,从而干扰食糜中氨基酸的正确测定。使得取样必须在动物处于麻醉状态下进行,故严格讲此方法应叫麻醉状态下回肠末端取食糜法 2、瘘管法 概念 在肠道的某一部位置一套管,通过套管来取得样本测定动物消化率的方法 分类 桥式瘘管法 T型瘘管法 缺点 瘘管法因套管堵塞和渗漏等现象的发生而无法用于测定高纤维日粮,尤其是非淀粉多糖含量高的日粮。 桥式瘘管法 需截断肠道,在截断端各植一个T型套管收集其全部食糜,测试完毕的食糜,加温后可从远端套管送回猪体内,以保持动物体内的正常生理代谢 优缺点 属于全取样法,样本代表性好,可不用指示剂 操作复杂 单T型瘘管 不截断肠道,安装一根T型瘘管,使食糜自然流出 优点 安瘘管后对荷术动物生理影响小,能保证动物正常的水、盐代谢 采样方便 缺点 因不可能收集全部粪尿,属于部分采样方法,必须用指示剂 取样可能不均匀,缺乏代表性,而且较麻烦 十二指肠瘘与回肠瘘 双T型瘘管 由于是双管T形管,采样时比单管更方便 单管只能取到定时的部分样品,而双管能接受到全部的消化液 能保证动物消化和水盐代谢的正常 3、回肠一直肠吻合术(IRA) 是通过外科手术将回肠末端和直肠相吻合 根据吻合部位的不同和术后有无回盲瓣将其分为四种 瓣前端端吻合术 瓣前端侧吻合术 瓣后端侧吻合术 瓣后端端吻合术 回肠—直肠吻合术 优点 手术过程相对简单,猪恢复快,易于收集到代表性的样本, 日粮类型不受限制 缺点 由于游离大肠,使得受术猪的正常生理状况受到影响,能量、氮、水、电解质均有不同程度的改变 4、活动尼龙袋技术(MBNT) 采用体外胃蛋白酶预消化,然后用作了回直肠吻合术的猪,经十二肠“T” 型瘘管放入尼龙袋测定猪饲料蛋白回肠消化率 优点 工作量小,成本低,一次可以做大批量的饲料 可以对饲料营养价值进行排队,取得饲料相对营养价值。 与常规全收糜法测得的真消化率很接近 缺点 不适用于肠道十分狭窄的动物 5、动物模型法 以大鼠作为动物模型来测定猪对大麦、肉骨粉、鱼粉及其混合日粮氮和氨基酸回肠消化率 研究发现,大鼠和猪对于鱼粉的氨基酸回肠末端消化率除了丝氨酸外没有种属差异 大鼠作为生长猪的模型动物具有一定研究价值,但大鼠的生理结构与生长猪的生理结构有一定的差异,估测的氨基酸回肠末端消化率有一定的误差 三、消化率的测定 直接测定法 间接测定法 1 直接测定法 适合配合饲料和某些原料 优点 简单,直接以待测饲料为全部饲粮,无养分互作的干扰 缺点 某些饲料适口性差,时间长后可能导致营养缺乏症 2 间接测定法 饲料替代法,套算法或二次试验法 原理 被测料替代实际基础饲料的一部分,分别测定基础饲粮和替代后饲粮的养分 优点 克服养分不平衡的影响 缺点 基础饲粮营养平衡,则代入被测饲料后可能出现不平衡 需作两次试验 养分间存在互作效应,导致偏差 间接测定法 步骤 第一次消化试验 测定基础饲粮养分消化率 第二次消化试验 测定新饲粮养分消化率 要求 为减少动物的影响,用
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