分子生物学基础知识.ppt

一、核酸分子的基本组成 1、核苷酸 ＝ 核苷+磷酸 磷酸酯键 戊糖+碱基+磷酸 1、定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 DNA一级结构的基本特点 4种dNTP以3’、5’磷酸二酯键相连构成一个没有分枝的线性大分子。它们的两个末端分别称5’末端（游离磷酸基）和3’末端（游离羟基）。 (六) DNA与RNA在组成上的区别 二、DNA的空间结构 ②右手螺旋 2、双螺旋结构的多样性 ?Z-DNA是比较特殊的，它与其他DNA不同之处在于它是在减数第一次分裂前期中的偶线期产生的，约占DNA总量的0.3%。 当一段Z-DNA形成时，其两端必为B-Z相互结合型态，形成与B-DNA的接口。 Z-DNA能够与B-DNA构成相互结合型态，这种结构会使一对碱基突出于双螺旋之外。 三、DNA的功能 四、RNA的结构 (二) RNA的种类: (三) mRNA 含量最少 种类繁多 半衰期最短 原核生物mRNA为多顺反子 真核生物mRNA为单顺反子 ② tRNA的三级结构——倒L形结构 DNA拓扑异构：是指DNA 分子在双螺旋的基础上更高层次的结构紧张状态与松弛状态，即超螺旋状态与解旋状态之间的相互转换过程。 特点：这过程不发生碱基组成或顺序的任何改变。 作用：超螺旋的解旋是复制或转录前的必要准备，除了缓解张力以利于复制或转录过程的正常进行外，更重要的是暴露DNA 分子中的结合位点，使参与复制或转录的各种调控蛋白发挥作用。 端粒酶(Telomerase)是使端粒延伸的反转录DNA合成酶。是个由RNA和蛋白质组成的核糖核酸-蛋白复合物。其RNA组分为模板,蛋白组分具有催化活性,以端粒3末端为引物,合成端粒重复序列。端粒酶的活性在真核细胞中可检测到，其功能是合成染色体末端的端粒，使因每次细胞分裂而逐渐缩短的端粒长度得以补偿，进而稳定端粒长度。主要特征是用它自身携带的RNA作模板，通过逆转录合成DNA。  Dna A 1) 在DNA复制过程中，识别起点序列，并在起点特异位置解开双链的一种蛋白质。 2) DNA复制起点上有四个9bp的重复序列，为Dna A蛋白的结合位点。 3) DNA缠绕其上，形成起始复合物（initial complex）。 解链过程中正、负超螺旋的形成 复制的方式——半保留复制 复制的高保真性 双向复制 半不连续复制 复制起始点具有特殊的序列 形成复制叉结构 需要RNA引物 3、复制的基本规律： (二) DNA的损伤与修复 1、引起突变的因素： 物理因素 紫外线照射 电离辐射 化学因素 稠环芳香烃 黄曲霉素B 亚硝酸盐 生物因素 碱基错配 UV 2、DNA损伤修复： 光修复 光修复酶 UV UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 ATP 切除修复 ②功能 a、稳定mRNA b、有利于mRNA由核内到胞浆的转位 c、有利于与核糖体蛋白的结合、与翻译起始蛋白的结合 3、真核生物mRNA的3′－poly（A）尾巴： ①结构：200多个串联的聚合腺苷酸，poly（A）长则半衰期长 ②功能： a、稳定mRNA模板 b、有利于从核内到胞浆的转运 4、真核生物mRNA的5′－非翻译区， 3′－非翻译区： hnRNA （胞核） 内含子 (intron) mRNA （胞液） 外显子 (exon) DNA （胞核） protein 5′mG 3′poly（A） 1、原核细胞和真核细胞的核糖体组成 　 原核细胞 真核细胞(哺乳动物细胞) 　 沉降常数 近似分子量 沉降常数 近似分子量 核蛋白体 70S 2.7×106 80S 4.6×106 小亚基 30S 0.9×106 40S 1.5×106 rRNA 16S 0.6×106 18S 0.7×106 蛋白质 21种 0.3×106 约30种 0.78×106 大亚基 50S 2.0×106 60S 3.0×106 rRNA 23S 1.2×106 28S 1.7×106 　 　 　 5.8S 4.0×104 　 5S 3.2×104 5S 3.2×104 蛋白质 34种 0.7×106 约50种 1.37×104 (四) rRNA 2、rRNA的特征： 分子量最大，含量最多占RNA的80％ 一级结构较保守，代谢稳定 含甲基化碱基较多，利于与蛋白质结合 含有许多基环结构，存在大量氢键 3、rRNA的二级结构 ——基/茎环结构 大肠杆菌16S rRNA的二级结构