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HPSE2在非小细胞肺癌中表达与预后的关系.doc

HPSE2在非小细胞肺癌中表达与预后的关系   【摘要】目的检测乙酰肝素酶-2(heparanase-2, HPSE2)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况, 并探讨其与NSCLC的临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测82例NSCLC患者及10例癌旁正常肺组织中HPSE2的表达。结果HPSE2主要定位于细胞浆, 在82例NSCLC组织中, 30例(37%)为高表达, 在非癌肺组织中弱表达或无明显表达。HPSE2高表达同局部淋巴结转移减少(P=0.012), 患者预后生存时间延长相关(P=0.027)。结论HPSE2的表达与NSCLC局部淋巴结转移减少及患者预后生存时间延长相关。   【关键词】乙酰肝素酶-2;非小细胞肺癌;肿瘤标志物;免疫组织化学肺癌一直都是全球范围内高死亡率的恶性肿瘤, 并且死者中80%为非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者, 由于肿瘤发生、发展过程中大量具有调控作用的细胞因子活性发生变化, 寻找上述活性分子。乙酰肝素酶-2(heparanase-2, HPSE2)属于乙酰肝素酶家族 [1], 现已发现HPSE2在头颈部肿瘤、卵巢肿瘤、宫颈肿瘤、直肠癌、胃癌组织中高表达并与肿瘤进展存在关联[2-6], 但HPSE2在NSCLC组织中的表达情况目前尚无报道, 本实验将探讨HPSE2在NSCLC组织中的表达水平及其与肺癌临床病理因素之间的关系。   1材料与方法   1. 1材料选取2002年1月~2006年12月辽宁省肿瘤医院手术切除并经病理确诊的NSCLC标本82例, 其中49例具有完整随访资料。10例对照标本取自同期距离癌灶边缘5 cm以上并经HE染色证实的正常肺组织。所有患者术前均未接受放化疗。   1. 2方法   1. 2. 1免疫组织化学所有标本均用10%中性福尔马林固定, 石蜡包埋, 制成4 μm切片, 采用S-P法检测HPSE2蛋白表达情况。HPSE2单克隆抗体购自美国Santa cruz公司, S-P法试剂盒及DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术公司。切片滴加HPSE2一抗(1:100)4℃湿盒内孵育过夜, 次日按照SP试剂盒说明书进行染色, DAB显色, 苏木素复染。以PBS代替一抗作为空白对照。细胞染色强度以胞浆着色阴性、淡黄色、黄棕色、深棕褐色分别记0、1、2、3分;染色范围以着色细胞量占肿瘤细胞75%分别记0、1、2、3分, 两项计分相乘为最终得分(0~9分), 得分≤4分为低表达, 4分为高表达。   1. 3统计学方法采用SPSS13.0统计软件进行数据分析处理, 免疫组织化学染色结果各组间的比较采用χ2检验及 Fisher 确切概率法, 生存数据分析采用 Kaplan-Maier 法, 采用 log-rank 法判断差异性, P0.05表示差异具有统计学意义。   2结果   2. 1免疫组化结果免疫组织化学染色显示, HPSE2主要定位于细胞浆, 82例NSCLC组织中, 30例(37%)为高表达, 在非癌性肺组织中弱表达或无明显表达。HPSE2高表达同局部淋巴结转移减少(P=0.012)相关, 与患者年龄(P=0.658)、性别(P=0.96)、肿瘤组织类型(P=0.654)、pTNM分期(P=0.266)、肿瘤体积(P=0.105)、肿瘤分化水平(P=0.174)等均无相关性。.   2. 2HPSE2表达水平与NSCLC患者预后生存率之间的关系对49例有完整的术后随访记录的患者进行Kaplan-Meier生存时间分析显示: NSCLC组织中HPSE2高表达组患者生存时间高于低表达组生存时间[(61±4.31) VS (50±8.92)];Log-Rank, P=0.027)。   3讨论   乙酰肝素酶家族包括两个成员:乙酰肝素酶-1 (hepara-nase-1, HPSE1), 乙酰肝素酶-2(heparanase-2, HPSE2);HPSE1是一种β-D-内切葡糖醛酸酶, 在人肿瘤组织中常高表达并同肿瘤进展密切相关, HPSE1可通过水解细胞外基质、释放活性细胞因子及激活信号通路等方式调控肿瘤进展。HPSE2蛋白结构同HPSE1有大约59%的同源性, 在脑、乳腺等组织中常有较高表达[1], 在头颈部肿瘤、卵巢肿瘤、宫颈肿瘤、直肠癌、胃癌组织中高表达[2], 但其所发挥的具体生物学作用及机制尚不十分明确。   HPSE2在NSCLC组织中表达情况及临床病理意义目前尚无报道, 通过免疫组织化学染色发现HPSE2在NSCLC组织的表达强度高于癌旁组织及正常肺组织, 这与其他肿瘤的研究结果相一致。经进一步统计分析发现, HPSE2高表达与NSCLC局部淋巴结转移

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