HPV L1壳蛋白和MMP―2在宫颈病变表达及临床意义.docVIP

HPV L1壳蛋白和MMP―2在宫颈病变表达及临床意义 　　【摘要】 目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）L1壳蛋白及MMP-2在不同宫颈病变表达及临床意义。方法 宫颈疾病患者121例， 术前HPV-DNA均为阳性， 采用免疫组化方法检测HPV L1壳蛋白和MMP-2在各级宫颈病变组织的表达情况。结果 121例患者中， HPV L1蛋白在正常宫颈组、CIN I组、CINⅡ组、CINⅢ组、SCC组阳性表达分别为69.69%（23/33）、83.33%（15/18）、36.84%（7/19）、4.70%（1/21）、0（0/30）。CIN中为37.93%（23/58）。除了CINⅢ与SCC比较差异无统计学意义（P0.05）外， 其他不同宫颈病变间比较， 差异有统计学意义（P0.05）；MMP-2 在正常宫颈组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、SCC组的阳性表达分别为6.06%（2/33）、33.33%（6/18）、57.89%（11/19）、66.66%（14/21）、76.66%（23/30）， CIN中53.44%（31/58）。正常组织中MMP-2 的阳性率明显低于CIN 组及SCC组。MMP-2 在正常宫颈组、CIN组、SCC组比较， 三组间差异有统计学意义（P0.05）。CINⅠ组中HPV L1蛋白阳性表达率最高， 随着病变程度的增加， 其阳性表达率明显下降。SCC组中MMP-2阳性表达率最高， 随着病变程度的增加， 其阳性表达率明显增加经相关性结果分析显示宫颈病变中HPV L1壳蛋白和MMP-2表达呈负相关（P0.05）。结论 HPV L1壳蛋白阳性表达率随着宫颈病变的演变及发展而呈降低趋势， MMP-2阳性表达率随着宫颈病变的演变及发展而呈增加趋势。联合二者在宫颈病变的发生发展中具有一定意义， 可作为宫颈癌前病变进展的生物学标志物。 　　【关键词】 人乳头状瘤病毒L1壳蛋白；MMP-2；宫颈上皮内瘤变；鳞状细胞癌；免疫组化 　　宫颈上皮内瘤变（CIN）反映了子宫颈癌发生发展中的连续过程， 通过筛查发现CIN， 及时治疗高级别病变， 是预防子宫颈癌行之有效的措施[1]。研究已表明， 生殖道感染人乳头瘤病毒（HPV）是妇女宫颈癌和癌前病变的主要危险因素， HPV L1壳蛋白是HPV 感染复制早期所必须的结构蛋白， 故可通过检测HPV L1壳蛋白来研究HPV感染状态。细胞外基质（ extracellular matrix， ECM） 降解对于肿瘤的浸润转移和血管生成至关重要。基质金属蛋白酶（ MMPs） 是降解ECM 的重要酶类， MMP-2可能在宫颈癌细胞增殖、血管生成、浸润转移等过程中发挥重要作用。本研究通过免疫组化检测HPV L1蛋白及MMP-2在不同宫颈病变过程的表达情况， 探讨其在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌发展中的相关性。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 入选2010年9月～2013年9月许昌市中心医院手术治疗的宫颈疾病患者121例， 术前HPV-DNA均为阳性， 其中宫颈鳞状细胞癌（SCC）30例、CIN 58例（其中CIN I、CINⅠ、CINⅢ分别为18例、19例、21例）， 正常宫颈33例（因子宫良性病变而行子宫全切除标本， 术前宫颈外观正常， 术后病理诊断为宫颈炎标本）。所有患者均无宫颈锥切、子宫切除、放化疗史。 　　1. 2 方法 MMP-2及HPV L1检测法应用链霉素亲生物素-过氧化物酶法（SP法）进行检测。 　　1. 3 试剂 HPV L1鼠抗人单克隆抗体购自赛泰公司， SP试剂盒及DAB酶底物显色剂等均购自福州迈新生物技术开发有限公司。兔抗人MMP-2抗体购自北京博奥森科技实业有限公司。 　　1. 4 判断和评估标准 MMP-2结果按照以下评判标准[2]进行半定量判断：两位病理医师专家各自独立观察随机每例切片随机选取10个高倍视野进行结果判定。按染色强度及阳性细胞数所占百分比综合计分。即：0分为阳性细胞数75% 。按着色强度记分：1分为染色呈淡黄色， 2分为染色呈黄色， 3分为染色呈棕黄色。两种记分的乘积即为阳性强度：0分为阴性（-）， 1～4分为弱阳性（+）， 5～8分为中度阳性（++）， 9～12分为强阳性（+++）。有一个被染色的细胞核呈红色即认为HPV L1 壳蛋白表达呈阳性。 　　1. 5 统计学方法 采用 SPSS18.0统计软件进行统计处理。计数资料采用χ2检验和Fishers 确切概率法， 相关分析使用单因素直线相关分析， P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2. 1 HPV L1壳蛋白和MMP-2在不同宫颈病变组织中的表达 HPV L1壳蛋白在正常宫颈组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、SCC组阳性表达分别为69.69