动物细胞培养和核移植.pptVIP

动物细胞培养的概念 从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖. 动物细胞的培养过程 接触抑制(contact inhibition) 有关概念 培养条件细胞在体外培养中所需的条件与体内细胞基本相同。 【讨论】 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，讨论问题：体外培养细胞时需要提供哪些条件？ 提示：无菌、无毒的环境；营养；适宜的温度和pH；气体环境。 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、一定的营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。） 3、适宜的温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。 4、合适的气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 培养器皿 培养工具: 培养瓶、培养皿、培养管、多孔培养板等。 植物组织培养和动物细胞培养的比较 * * * 皮肤烧伤，常常需要植皮。如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤？ 动物细胞培养 原理：细胞增殖 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 胰蛋白酶处理的目的？ 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。 原代培养：从机体取出后的初次培养为原代培养。（分装前的细胞培养） 传代培养：将原代培养的细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 3、动物细胞培养过程： 胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 　　细胞株：传代培养的细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 补充合成培养基中缺乏的物质 动物细胞培养瓶内表面为什么 要光滑、无毒？ 在培养过程中，如何才能保持无菌 与无毒的环境？ 细胞培养以玻璃器皿为主。 器皿应选择透明度好、无毒、 中性硬度玻璃制品。 4.动物细胞培养技术的应用: 1.获得细胞产物（蛋白质生物制品的生产） 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 3.获得细胞用于检测有毒物质 4.细胞的生理、药理、病理研究 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 细胞的全能性 细胞增殖 固体培养基 液体培养基 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 植物体 细胞株、细胞系 快速繁殖、 培育无病毒植株 获得细胞或 细胞分泌蛋白 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 理论基础：动物细胞核具有全能性 1、卵母细胞比较大，便于操作； 2、卵母细胞内含有丰富的营养，可以为胚胎的最初发育提供养料； 3、卵母细胞质中可能有特殊物质能激发体细胞核的全能性而恢复分裂能力。 为什么要用去核的卵母细胞做受体细胞？ 去核卵母细胞 体细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体 * * *