液态活检在肿瘤的现状和趋势要点.pptxVIP

液态活检在肿瘤研究的现状和趋势分析 内容概括 液态活检概念 循环肿瘤细胞及其核酸 游离肿瘤核酸 组织活检的局限性 很多肿瘤患者无法进行手术 穿刺受检者严重的不合适 穿刺自身的临床风险 某些肿瘤解剖位置不便进行穿刺 肿瘤的异质性 阿拉伯医生Albucasis （936-1013）及其发明的外科手术器械 Folia Histochem Cytobiol. 2009年47卷2期191-7页 液态活检（liquid biopsy） 循环肿瘤细胞（Circulating tumor cell，CTCs） 游离肿瘤DNA（ Circulating tumor DNA，ctDNA或者 Circulating Free DNA，cfDNA） 血检 CTC CTC—转移过程中必经阶段 CTC： 是否是介导肿瘤转移的细胞？ J Clin Oncol. 2009;27(20):3303-3311 J Clin Oncol.?2008;26(19):3213-21 Clin Cancer Res.?2008 ;14(19):6302-9 CTC的生物学功能 Circulating Tumor Cell Clusters Are Oligoclonal Precursors of Breast Cancer Metastasis Tumorigenicity and genetic profiling of circulating tumor cells in small-cell lung cancer Nat Med.?2014?;20(8):897-903 Cell Rep.?2014?Sep 25;8(6):1905-18 Cell.?2014 28;158(5):1110-22 Single-cell RNA sequencing identifies extracellular matrix gene expression by pancreatic circulating tumor cells CTC检测方法 与血液细胞相比，肿瘤细胞具有以下特征： 体积更大； 液相流动性更大； 细胞膜的电容和电导特性不同； CTC确认标准： DAPI染色阳性； 组织来源相关CK染色阳性； CD45染色阴性； 肿瘤相关抗原染色阳性 （MUC1，HER2，PSA et al.） 其它辅助方法：FISH ， H?E，PCR ， EPISPOT EMBO Mol Med. 2015 Jan; 7(1): 1–11 CTC临床治疗?治疗决策 预后预测不应只是一切的终点，而应是一切的开始 虽然CTC对接受一线化疗的转移性乳腺癌患者预后具有重要意义，但是针对一线化疗后CTCs仍升高的患者换用其它化疗方案并不能有效地延长患者生存期。 Circulating?tumor?cells?and?response?to?chemotherapy?in?metastatic?breast?cancer:?SWOG?S0500 CTC的分子特征 Solidifying?liquid?biopsies:can?circulating?tumor?cell?monitoring?guide treatment selection in breast cancer? CTC的简单计数，并不能反应肿瘤细胞内在的生物学特性，而正是这种特性是决定了不同的肿瘤细胞对治疗具有不同的反应。因此，对CTC细胞的分子特性（例如药物靶向基因的表达，药物耐受相关基因突变的检测）的精细刻画，将有利于充分发掘CTC在指导临床治疗的价值。 ?Treat—CTC: Trastuzumab?in?HER2-negative?Early?breast?cancer?as?Adjuvant?Treatment?for?Circulating?Tumor Cells?? 在CANCER RESEARCH 全文下载不到 CTC—单细胞测序 Method of the Year 2013 Multiple Annealing and Looping Based Amplification Cycles（MALBAC） multiple displacement amplification(MDA) MDA扩增方法优点： 不引入接头序列 SNV假阳性率较低 （—0.001%） 数据不易受外源DNA污染影响 MALBAC扩增方法优点： 拟线性扩增，适合CNV分析； 数据重现性较好 CTC—单细胞测序优势 Whole-exome sequencing of circulating tumor cells provides a window into metastati