应用免疫印迹法探讨血清幽门螺杆菌抗体谱与上消化道疾病的关系.docVIP

应用免疫印迹法探讨血清幽门螺杆菌抗体谱与上消化道疾病的关系 　　【摘要】 目的：用免疫印迹法检测幽门螺杆菌（Hp）感染中不同血清分型与慢性浅表性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、消化性溃疡（PU）和胃癌（GC）的关系。方法：选取确诊为Hp感染的上消化道疾病患者205例，用Western blot法（免疫印迹法）测血清幽门螺杆菌抗体谱，检测Hp抗体分型，分析CagA和/或VacA抗体阳性的表达情况。结果：在Hp现症感染中，CSG、CAG、PU、GC患者的HpⅠ型感染比例明显高于Ⅱ型感染（P0.01）；PU及GC中HpⅠ型感染率高于CSG（P0.05）。不同年龄段及不同性别中HpⅠ型感染比例均高于Ⅱ型感染（P0.01）。各组的Hp I型感染者中以CagA+VacA抗体为主，检出率为77.4%；其中以CSG组最低（70.4%）、GC组最高（81.8%）。各组CagA+VacA抗体检出率显著高于单一CagA/VacA抗体检出率（P0.01）。结论：应用免疫印迹法进行幽门螺杆菌血清学分型检测对于上消化道疾病的判断有临床指导意义，Ⅰ型Hp感染更需要进行根治。 　　【关键词】 幽门螺杆菌； 免疫印迹法； 分型； CagA； VacA 　　幽门螺杆菌（Hp）是一种人类最常见的慢性致病菌。目前已经确认Hp与4种上消化道疾病疾病有密切关联：（1）慢性胃炎；（2）消化性溃疡病；（3）胃癌；（4）胃黏膜相关性淋巴样组织（mucosa-associated lymphoid tissue MALT）淋巴瘤[1]。目前认为细胞毒素相关蛋白A（Cytotoxin associated gene A，CagA）、空泡毒素（Vacuolating cytotoxin A，VacA）与Hp的致病力密切相关[2]。本研究使用免疫印迹法对确诊Hp感染的上消化道疾病患者进行血清Hp抗体检测，并进行分型，探讨血清幽门螺杆菌抗体谱与上消化道疾病的关系。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 收集2013年2-12月因上腹痛、饱胀、纳差、黑便等症状在本院消化内科门诊就诊及住院的患者205例。所有调查者均行胃镜检查，其中慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃癌均行病理活检确诊。分别为：慢性浅表性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、消化性溃疡（PU）、胃癌（GC）。患者中男121例，女84例，年龄14～86岁，平均（44.91±16.66）岁。入选标准：（1）除外近期服用NSAIDs；（2）1个月内未服用抗生素、抑酸剂、PPI及铋剂；（3）14C呼气试验及免疫印迹实验阳性；（4）除外孕妇和儿童。 　　1.2 试剂 14C尿素胶囊1粒（1 μCi）及呼气卡，由安徽养和医疗器械有限公司生产；Hp抗体分型检测试剂盒由深圳市帕劳特生物制品有限公司提供。 　　1.3 方法 14C呼气试验：患者应空腹或禁食4 h，阳性提示Hp现症感染；Hp抗体分型检测：严格按试剂盒说明进行操作。 　　1.4 Hp抗体分型判断标准 Ⅰ型Hp（HpⅠ）：显示CagA和/或VacA抗体阳性；Ⅱ型Hp（HpⅡ）：仅UreA和/或UreB（尿素酶）抗体阳性，CagA和VacA抗体阴性；Hp阴性：CagA、VacA、UreA、UreB抗体均阴性。 　　1.5 统计学处理 应用SPSS 19.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以（x±s）表示，比较采用单因素方差分析，方差齐采用LSD分析进行两两比较，计数资料比较采用 字2检验，以P0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Hp不同血清分型在不同年龄组中阳性率的比较 205例患者均为Hp现症感染，其中HpⅠ型感染173例，阳性率为84.4%；HpⅡ型感染32例，阳性率为15.6%。在不同年龄组中HpⅠ型感染率比较差异无统计学意义（P0.05），但HpⅠ型感染的发生率明显高于HPⅡ型感染（P0.01）。 　　2.2 Hp不同血清分型在不同性别中阳性率的比较 121例男性患者中100例为HpⅠ型感染，阳性感染率为82.6%；84例女性患者中73例为HpⅠ型感染，阳性感染率为86.9%。男女患者HpⅠ型感染阳性率比较差异无统计学意义（P0.05），但HpⅠ型感染的发生率明显高于HPⅡ型感染（P0.01）。 　　2.3 Hp血清学分型在消化系统疾病中的表达情况 CSG、 　　CAG、PU、GC组中的HpⅠ型感染率显著高于Ⅱ型（P0.05）；CAG、CSG组HPⅠ型感染率比较差异无统计学意义（P0.05）。 　　2.4 不同疾病的Hp I型中CagA、VacA抗体的表达 在 　　四组的Hp I型感染者中检测CagA、VacA抗体的表达情况，发现以CagA+VacA抗体为主，检出率为77.4%；其中以CSG组最低（70