薄层色谱基础知识及斑点异常讲解.pptVIP

* 拖尾 斑点异常与克服 1.点样量过载 任何吸附剂，它们的负载化合物的能力是有一定限度的，因此点样过量而超载后，过剩的化合物被抛在后面，形成拖尾现象 克服方法：A.点样时可以点成条带状 B.选用稍厚一点的板 * 拖尾 斑点异常与克服 2.点样圆心未重合 样点虽然在同一垂直线上但样点上下圆心没有重合，致使样点呈近椭圆形，也是形成拖现象的原因之一 克服方法：点样位置要准确，预先设计好点样的位置，然后用铅笔作好标记，每次点样对准圆点 * 拖尾 斑点异常与克服 3.展开剂的配制 * 拖尾 斑点异常与克服 4.薄层板 为了提高样品的分离度和减少斑点的拖尾，铺板时在硅胶中加入某些酸（如硼酸，草酸），碱（如氢氧化钠），盐（如磷酸二氢钠，磷酸氢二钠）等将硅胶板改性 克服方法：硅胶预制板可用浸板的办法改性 * 边缘效应 2、薄层板 3、展开剂未预饱和 斑点异常 1、点样边距 4、其他 * 边缘效应 斑点异常与克服 1.点样边距 * 边缘效应 斑点异常与克服 2.薄层板 薄层板厚薄不均匀，两边厚或者两边薄都是形成边边缘效应的原因之一 克服方法：选用符合要求的薄层板。（符合要求的薄层板应该在反射光下板面平滑均匀，无气泡，灰尘或颗粒，透射光下薄层纹理均匀细腻） * 边缘效应 斑点异常与克服 3.预饱和 在薄层板上一般是边缘上的展开剂较容易挥发,如果这几个有机溶剂的挥发性能差异比较大,那么就会造成薄层板上边缘和中间展开剂比例的差异而产生展开速度不一致的现象 克服方法：展开前要充分饱和 * 薄层色谱基础知识 黔中翁人 及斑点异常的原因和克服 * 薄层色谱 操作的流程 结果判定 显色 展开 点样 薄层板 * 薄层板的制备 什么是固定相？ 固定相 * 薄层板的制备 常用固定相 1、聚酰胺 2、硅胶 3、硅澡土 4、氧化铝 5、纤维素 6、其他 * 薄层板的制备 聚酰胺 1、什么是聚酰胺？ 2、聚酰胺适合那些化合物的分离？ 聚酰胺适用于多元酚类化合物分离，如黄酮，醌类，酚酸，含羰基的化合物等 * 薄层板的制备 硅胶 1、什么是硅胶 2、硅胶适合酸性和碱性等化合物的分离 * 薄层板的制备 硅胶 硅胶G 硅胶H/硅胶N 硅胶GF245 硅胶HF254 3、实验室硅胶有哪些型号 硅胶S * 硅胶G和硅胶S 薄层板的制备 1.硅胶G是指硅胶粉+15%煅石膏。 2.硅胶S是指硅胶粉+15%淀粉。 * 硅胶H或硅胶N 薄层板的制备 是指纯硅胶粉，没有添加任何粘合剂 * 硅胶H和硅胶G的应用 薄层板的制备 1物质是有色的，在日光看 2物质没有颜色但可以利用显色剂显色 3.可以荧光显色 * 硅胶HF254和硅胶GF254 薄层板的制备 1.是指添加了荧光剂，如硫化镉等。 2.应用范围：物质有荧光，在254波长紫外下看其荧光；物质没荧光，在254波长紫外下看暗斑（荧光淬灭） * 薄层板的制备 无黏合剂 自制板 含黏合剂 * 薄层板的制备 黏合剂 cmc-na溶液的配制 先将称好的CMC-Na加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,再加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短. * 薄层板的制备 黏合剂 cmc-na溶液的浓度 溶液的浓度0.3-0.7%比较合适，实际操作中0.4％～0.5％最为实用，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，不好保存 * 薄层板的制备 黏合剂 cmc-na溶液的存放 注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄，而且可能有霉菌出现，最好不要使用。 * 薄层板的制备 操作：除另有规定外，是指将1份固定相和3份水溶液，研磨混合，置玻璃板上使涂布均匀，平台上于室温下晾干，活化后，置有干燥器中备用。 制板 * 注意点 1.沿同一方向研磨混合，避免产生气泡 2.厚度为0.2－0.3mm，涂层薄，点样容易过载；涂层厚，显色不那么明显 3.室温下在水平位置放置，待薄层发白近干 薄层板的制备 * 注意点 5.研磨时间 6.铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量 。 薄层板的制备 * 活化 2.在105－110度活化30分钟。 3.一般检识水溶性成分或一些极性大的成分时，所用薄层板只在空气中自然干燥，不经活化即可贮存备用 。 薄层板的制备 1.薄层板为何要进行“活化”？ * 薄层色谱的点样 点样器 * 薄层色谱的点样 洁净 、干燥 点样环境 * 薄层色谱的点样 点样的形状 1、圆