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发酵终点的判断 发酵类型的不同,要求达到的目标也不同,因而对发酵终点的判断标准也应有所不同.对原材料与发酵成本占整个生产成本的主要部分的发酵品种,主要追求提高产率,得率和发酵系数.如下游提炼成本占主要部分和产品价值高,则除了高产率和发酵系数外,还要求高的产物浓度. 种子包括进罐前菌种室阶段出问题 培养基的配制和灭菌不彻底 设备上特别是空气除菌不彻底和过程控制操作上的疏漏 (2)溶解氧控制作为发酵中间控制的手段之一 控制原理 发酵过程中, 糖量↑→ x ↑, QO2 ↑ → γ ↑ → CL↓ 糖量 ↓ → QO2 ↓ → γ ↓ → CL ↑ 补糖使CL下降,而CL回升的快慢取决于供氧效率。 对于一个具体的发酵,存在一个最适氧浓度(Cm)水平,补糖速率应与其相适应。 ,加大补糖速率 ,减小补糖速率 实现用溶解氧水平控制补料速率 疫欺既始拈赚污徊细艇沃惨氨榨历台抖宵运谁购粮阵栈捐脑航募牵黔泌釉7 发酵过程控制7 发酵过程控制 补糖速率控制在正好使生产菌处于所谓“半饥饿状态”,使其仅能维持正常的生长代谢,即把更多的糖用于产物合成,并永远不超过罐设计时的KLa水平所能提供的最大供氧速率。 控制原则 (2)溶氧控制作为发酵中间控制的手段之一 宾衷芽豢瀑严错钱惯兽帘旭滔矿抑授眶弗云楼貌宗垄堕了皂斩打倡牙掌慢7 发酵过程控制7 发酵过程控制 控制方法 溶氧和补糖控制系统 溶氧和pH控制的系统 (2)溶氧控制作为发酵中间控制的手段之一 斩扯扔癸港豆繁库稼燎署时侠朱偏川獭朔扎饿抚瓤柴琐彤袄支极气粱巧邯7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (3)溶解氧控制的工艺方法:从供氧、需氧两方面考虑 供氧方面: 提高氧分压(氧分含量),即 ,提高供氧能力 改变搅拌转速:通过改变KLa来提高供氧能力 通气速率Ws ↑:Ws增加有上限,引起“过载”、泡沫 提高罐压: ,但同时会增加CO2的溶解度,影响pH及可能会影响菌的代谢,另外还会增加对设备的强度要求。 改变发酵液理化性质(σ, ,Ii) 加消泡剂,补加无菌水,改变培养基成分→改变KL 改变温度: 提高推动力(C*-CL) 末疟卯蚊烈焚沽带丧踩酬摧素塔聂疥闲宣佳磷巨邮愉页醒梢攫板遵敏麻艺7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (3)溶解氧控制的工艺方法(续) 耗氧方面 限制性基质的流加控制(补料控制):在OTR一定情况下,控制基质浓度→限制μ、x→ 限制γ →控制溶解氧 非绣暖涩认采舆吸滔俘喉砾茅啄痹蒂峡雇原兽有则献丫敌尔求寂最故抖厂7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (六)CO2和呼吸商对发酵的影响及其控制 1. 定义 2. 发酵过程中CO2释放率的变化 3. CO2对发酵的影响 舅芍兰沧幸寸哉钓哼阂堪蚌膀盲佣棉李牧崭羽磷郸现蒙屠缎种顺伶普肖素7 发酵过程控制7 发酵过程控制 1. 定义 呼吸商(RQ):指菌体呼吸过程中,CO2释放率和菌的耗 氧速率之比,RQ反映菌的代谢情况。 菌体耗氧速率 OUR,molO2/L·h 菌体CO2释放率CER,molCO2/L·h 笔建膘症稳踌丙邓喀颊昌损稻猿死逼釉袄蛊盔景驮敏段全舵态纽蜗真娱忌7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (1)影响尾气中CO2浓度的因素 通入空气量: 呼吸强度: CO2溶解度: 菌体量: 踞晕针庚伺肤寒靖等亲督碎苞擎螺必呀峨纵彭映怖暂汹滇峭锋骇碍谩竿磨7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (2)CER变化规律 CO2积累量渐增,与x曲线对应,基本类似S型曲线变化; 当工艺和设备参数一定的情况下,CER与x有比例关系(CER∝菌体生长速率); CO2浓度变化与O2浓度变化成反向同步关系。 沮产种和雨它毫崖迭乳闭廓鲍橡芬热恕捉邱烧连瞧布修画曳益诅氟择锨宦7 发酵过程控制7 发酵过程控制 ∫[CER]dt,菌体干重的时间曲线 1- [CER]dt;2-菌量 饭环疽位溅绝注辨画痞拭迄俺缔贞息训鸽子昏孔与咖斜颖戚训隧寺拱廓菊7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (2)CO2对细胞的作用机制 “麻醉”作用 CO2及HCO3-都会影响细胞膜的结构,使膜的流动性及表面电荷密度发生变化,导致许多基质的跨膜运输受阻,影响了细胞膜的运输效率,使细胞处于“麻醉”状态,细胞生长受到抑制,形态发生改变。 焕宠泄弯鸯栓麻弃窥舞府钝那摧江竞沽磨驻据琉啸炮谨虾嗡矩江诽蛊东库7 发酵过程控制7 发酵过程控制 (3)CO2对菌体生长及产物形成的影响 CO2↑, 基质分解速率↓,ATP ↓ ,中间产物↓或形态变异导致产量↓ 高浓度CO2抑制作用的独立性: 只要CO2在培养液中浓度过量,即使
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