《生理科学实验作业范本》生理科学实验-实验24肠肌20130918.pptVIP

实验24. M胆碱受体和H1组胺受体激动剂对离体豚鼠回肠的作用 唐法娣 （fadit@zju.edu.cn) 浙江大学医学院 2013.9 Experiment 24. Effects of M-cholinergic receptor and H1- receptor Agonists on isolating guinea pig ileum 预习要求 1.预习：理论-方法 2.实验设计：根据提供的三个未标记的已知药乙酰胆碱、组胺和氯化钡，利用阿托品和氯苯那敏对三个药品进行识别，要求根据实验目的设计实验。 观察胆碱能神经递质acetylcholine (Ach、乙酰胆碱），炎症介质histamine (His、组胺）对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。 实验目的 激动剂与拮抗剂的作用机制： 乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M-受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。 阿托品：为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体结合，从而阻断乙酰胆碱对M-受体的激动作用。 实验原理 3. 组胺:组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H1受体结合，通过激活G蛋白-磷酸脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，平滑肌收缩。 4. 氯苯那敏（扑尔敏）：为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。 实验原理 5. 氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，另一方面BaCl2兴奋胆碱能N受体， N受体有神经型和肌肉型， N受体激动时改变Na+、 K+、 Ca2+通道的电生理学特性，使肌肉收缩。 实验原理 1. 材料 1.1 实验动物 Dunkin-Hartley 豚鼠(guinea pig) 1. 材料 1.2 药品与试剂 未标记的激动剂：A，B，C。 10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液； 10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液； 10g/L BaCl2溶液。 拮抗剂：1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液； 10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液。 台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。 1.3 仪器： 离体装置： 双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器 、微距调节夹 恒温水浴箱、多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统 1. 材料 2.1 准备 清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度； 检查温度：37℃±0.5 ℃； 检查通氧: 单个小泡溢出; 打开电脑：选中桌面RM6240图标 选择“实验”---生理科学实验---肠肌 2. 方法 清醒豚鼠 轻击头部后股动脉放血 打开腹腔 取出回肠 制作回肠标本 一端固定在通气钩上 置含有37℃台氏液的浴槽中 通氧 另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接 连接RM6240生物信号采集处理系统 选择“实验”---生理科学实验---肠肌 归零 调节换能器张力（1g） 稳定20分钟 2. 方法 2.2 实验步骤： 找到回盲部，在离回盲部1cm处剪断回肠，取出回肠约15cm左右一段，置于盛有台氏液的培养皿中，将回肠剪成1-1.5cm的小段。 2.3 制作回肠标本： 0.5-1cm 线长50cm左右 2. 方法 回肠标本 放入麦氏浴槽中 将回肠标本的上端连线打一活结，勾在张力换能器的悬臂梁钩上 将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上， 选中桌面RM6240图标 选择“实验”--生理科学实验--肠肌 工具--快速归零（按右上快速归零Z）---调 “ 0” 旋转调节螺母，调张力至1g。（见左上显示平均1g左右） 调节螺母 将RM6240系统处在记