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专业:___临床医学 _姓名:__阮韦淑怡___邮箱:mailto:649338304@649338304@学号:___3100102457___日期:____2013.3.7_____地点:医学院教学B楼412 ________实验报告课程名称: 生理科学实验 实验类型: 动物实验 实验项目名称: 缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素 同组学生姓名: 沈丽莎 蒋卉 指导老师: 沈静 实验21 缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素阮韦淑怡 沈丽莎 蒋卉(浙江大学医学院10级生理科学实验1B班第 5组,浙江 杭州,310058)【摘要】 目的 复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型,观察不同缺氧类型的呼吸频率及血液色泽,了解中枢神经系统功能状态和体温对缺氧耐受性的影响,并掌握对照试验和控制实验条件的方法。方法 根据小鼠体重腹腔注射氯丙嗪置于冰浴上,对照组注射等量生理盐水放在室温中,待实验组呼吸频率到70次/分时,将两组置于缺氧装置中,记录存活时间,计算总耗氧量。另取小鼠置于2%的CO空间环境中记录生存时间和血液色泽。再取小鼠,根据体重注射亚硝酸钠后注射生理盐水,对照组注射亚硝酸钠和亚甲蓝,记录小鼠生存时间和血液色泽。结果 氯丙嗪加冰浴组的小鼠存活时间x±s=17.4±2.8,对照组存活时间x±s=47.0±3.7,P0.01,两者有显著差异;实验组总耗氧率(%)x±s=5.449 ±1.009,对照组为x±s=2.209 ±0.299,p0.01,两者有显著差异。乏氧性缺氧组小鼠死亡时间为25分钟内,皮肤为青紫色,肝血为暗红色。CO中毒组小鼠死亡时间为40分钟分,皮肤为樱桃红,肝血为鲜红色。亚硝酸钠小鼠死亡时间x±s=9.6,皮肤青紫,肝血为深褐色;亚硝酸钠加亚甲蓝组小鼠存活时间x±s=19.6,p0.01,与亚硝酸钠组有明显差异,皮肤青紫不明显,肝血为浅褐色。结论 氯丙嗪加冰浴能降低小鼠总耗氧率,增加其对缺氧的耐受性。乏氧性缺氧和血液性缺氧能造成小鼠死亡。低浓度亚甲蓝能有效缓解亚硝酸钠对小鼠的毒性作用。【关键词】缺氧;中枢神经系统;氯丙嗪;亚硝酸钠;一氧化碳当组织供养不足或用氧障碍时,机体的功能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧(hypoxia)。不同类型的缺氧,其机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型。本实验从缺氧的不同环节入手:通过密闭装置、注射亚硝酸钠等复制小鼠乏氧性缺氧、血液性缺氧病理模型、抑制中枢神经系统功能、降低动物体温,观察动物的缺氧耐受性。材料和方法实验对象 小鼠60只实验器材 密闭瓶,测耗氧装置,注射器等实验试剂 2.5g/L氯丙嗪,50g/L亚硝酸钠溶液,10g/L亚甲蓝溶液,生理盐水,CO,钠石灰。方法1.4.1 中枢神经系统机能状况、体温对缺氧耐受性的影响取性别相同、体重相近的小鼠20只随机分成生理盐水组、氯丙嗪加冰浴组,每组10只小鼠。生理盐水组每只小鼠按0.1mL/10g体重剂量腹腔注射生理盐水,并置于室温中;氯丙嗪加冰浴组每只小鼠按25mg/kg体重剂量腹腔注射2.5g/L氯丙嗪,并放置于冰上。待氯丙嗪加冰浴组小鼠呼吸频率降至70次/min后,将两组小鼠分别放入盛有钠石灰的125ml广口瓶内,连接测耗氧装置。从密闭测耗氧装置开始计时至小鼠死亡,记录小鼠的存活时间(T)。每隔5min记录各组小鼠呼吸频率。待鼠死亡后从量筒读出页面下降的体积,即为小鼠的总耗氧量(A)。1.4.2 两种缺氧动物模型的复制乏氧性缺氧 将10只小鼠分别放入盛有钠石灰的125ml密闭瓶中,从密闭开始计时至小鼠死亡,记录小鼠存活时间,并每隔5min记录小鼠呼吸频率。血液性缺氧CO中毒 将10只小鼠分别放入500ml广口瓶中,塞紧瓶塞。用10ml注射器抽取CO气体10ml,注入密闭瓶中,形成2%CO的空间环境。记录注入CO至小鼠死亡的时间。亚硝酸钠中毒 取性别相同、体重相近的小鼠20只,随机分为亚硝酸钠组合亚硝酸钠加亚甲蓝组,每组10只小鼠。两组小鼠每只腹腔注射0.2ml亚硝酸钠。亚硝酸钠加亚甲蓝组小鼠在注射亚硝酸钠后每只小鼠立即腹腔注射0.2ml亚甲蓝,亚硝酸钠组小鼠在注射亚硝酸钠后每只小鼠立即腹腔注射生理盐水0.2ml。记录两组鼠表现及存活时间。解剖以上4组小鼠,将其肝脏置于一张滤纸上,比较各组小鼠的肝脏及血液颜色,并记录。数据用Excel 统计,结果用x±s表示,并用t-test进行显著性检验,P0.01 表示差异显著。小鼠存活率用百分率表示。结果氯丙嗪及冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响见表1.表1.氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响样本小鼠体重(g)存活时间(min)总耗氧量(mL)总耗氧率(%)对照组实验组对照组实验组对照组实验组对照组实
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