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基于适配子的靶向治疗药物研究进度 　　适配子是通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrich- ment, SELEX) 从单链寡核苷酸文库中筛选获得的,能与靶标高特异性、高亲和力结合的配体。此文库一般采用寡核苷酸链两端的固定序列及中间为20～60bp 的随机序列组成。由于中间序列核苷酸存在大量不同的排列组合, 可形成不同的空间构象, 从而模拟了自然界存在的几乎所有可能与靶物质互相作用的空间结构。自1990 年Tuerk和Ellington等首次发表该研究以来, 适配子逐渐成为靶向治疗药物的研发热点之一。其独特优势主要表现在: 靶分子范围广泛, 靶点可以从金属离子等小分子到蛋白质大分子乃至整个细胞; 高特异性与亲和性, 适配子能够识别出靶分子结构上如甲基与羟基这样的细微区别, 且与靶分子结合后的解离常数处于纳摩尔和皮摩尔水平; 体外筛选, 与靶分子的结合条件可调控, 易人工合成, 可以通过SELEX 技术的自动化进行大批量低成本生产, 且批间差异较小, 同时也能针对毒素及免疫原性较弱的物质进行筛选; 稳定性好, 易修饰, 可以在适配子寡核苷酸的精确位点进行修饰, 避免其被体内核酸酶降解;分子小, 空间位阻小, 可以单独成药, 也可以连接各种标记分子进行临床诊断; 或者与一个甚至多个靶分子高效绑定,实现细胞内药物运送与治疗。作为低免疫原性[4]的“抗体类似物”, 适配子类靶向治疗药物应用于多种癌症、黄斑变性、血管性血友病和糖尿病等疾病的治疗, 有些药物已经通过FDA 认证批准上市, 在生物医药领域显示出巨大的应用前景。 　　1 核酸适配子药物的研发现状 　　适配子类药物通过靶向作用在疾病的发生发展过程中产生的“明星分子”, 干扰信号通路以达到治疗效果。至目前已经有越来越多的适配子在生物医学方面受到青睐。第 1 个适配子药物Macugen (哌加他尼那), 为特异性靶向血管内皮生长因子165 (vascular endothelialgrowth factor, VEGF165) 的27 个核糖核苷酸的RNA适配体, 通过眼部注射给药, 治疗年龄相关性黄斑变性 (age-related macular degeneration, AMD), 2004 年经美国FDA 获批上市。该适配体通过2#39;-氟嘧啶和2#39;-氧-甲基嘌呤修饰转录, 并加3#39;-3#39; 连接的脱氧胸苷终端帽来增加其稳定性, 同时在适配子5#39; 端连接一个40 kDa 的聚乙二醇 (polyethylene glycol, PEG) 分子, 延长其半衰期。 　　AS1411 (亦称AGRO100), 是针对癌症最早进入临床试验的富含鸟嘌呤的适配子, 也是特异性针对核仁最早的药物, 可自身形成G-四链体结构 ,并因此具有很多特殊的生物活性。该适配子通过静脉注射给药, 可以与肿瘤细胞表面过量表达的核仁膜蛋白外部域结合, 抑制核仁活性, 在细胞存活、生长、增殖、核运输和转录方面起着重要作用。REG-1 是第1 个被称为可调控的核酸适配子, 由针对凝血酶因子Ⅸa 的 RNA 适配子 (RB006) 和与RB006 相互补的单链RNA 寡聚核苷酸 (RB007) 构成 , 通过两者相互竞争使得REG-1 结构发生改变, 从而抑制凝血酶因子Ⅸa, 起到抗凝的效果。通过静脉注射给药, 在急性冠状动脉综合征患者中显示出很好的医疗价值。 　　另外, Lee 等筛选并鉴定出一个特异结合甲胎蛋白 (alpha fetoprotein, AFP) 的RNA 适配子, 此适配子可特异和有效地抑制由AFP 介导的肝癌细胞的增殖。Roth 等报道了一个可阻滞小鼠或人类的白细胞介素4 受体ɑ (IL-4ɑ) 的RNA 适配子, 该适配子靶向作用于髓源性抑制细胞 (myeloid-derived suppressorcells, MDSC) 和肿瘤相关巨噬细胞 (tumorassociatedmacrophages, TAM) , 并有效抑制肿瘤模型小鼠肿瘤细胞的生长。目前, 随着科研的不断深入, 更多的适配子药物进入临床试验阶段, 适应症包括新生血管性年龄相关性黄斑变性、癌症、急性冠状动脉综合征、血友病和糖尿病等,是目前已进入临床试验阶段的适配子药物。 　　2 核酸适配子作为靶向载体的研发现状 　　除了作为药物单独应用外, 适配子更多可作为药物递送系统中的靶向载体, 在机体系统给药后发挥靶向治疗作用。在肿瘤治疗过程中, 由于化疗药物对癌细胞的低选择性及对正常细胞的严重不良反应,适配子高效识别靶点的能力为化疗药物的递送提供了很好的平台, 是将药物传送到指