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λ一定（λmax作为入射波长），b一定，改变标准样的浓度c，测得相应的A，做A与c的关系曲线，目的：据未知样的A未确定c未。 1.定义：产生0.001的吸光度时，单位截面积（cm2）的光程内所含吸光物质的微克数，单位μg/cm2。 2.公式：A=0.001=abc bc=0.001/a c的单位g/L， 即106μg/1000cm3 b的单位cm,bc就是单位截面积(cm2)光程内吸光物质的微克数 S=bc· 106/1000 = bc·103 S=1/a ε = a M S=M/ε ε越大，S越小，灵敏度越高。 P291.习题2 浓度为25.5ug/50ml的Cu2+溶液，用双环己酮草酰二踪显色后测定。在λ=600nm处用2cm比色皿测得A=0.300，求透光率T，吸光系数a，摩尔吸光系数ε（已知铜的摩尔质量为63.55g） 1、有一符合朗伯－比尔定律的有色溶液，当先选用1cm比色皿时测得透光率为0.50, 若选用2cm比色皿时透光率为___ ___。 4、某显色配合物的摩尔吸光系数 ? 值很大，则表明------------------------------------------( ) (A)该物质的浓度很高 (B)该物质对某波长的光吸收能力很强 (C)测定该物质的灵敏度很高 (D)测定该物质的准确度高 5.以下说法错误的是--------------------------------------------------------------------------------( ） (A) 吸光度A与浓度呈直线关系 (B) 透光率随浓度的增大而减小 (C) 当T为“0”时吸光度值为∞ (D) 最大吸收波长随浓度变化而变化 λ一定（λmax作为入射波长），b一定，改变标准样的浓度c，测得相应的A，做A与c的关系曲线，目的：据未知样的A未确定c未。 定义：产生0.001的吸光度时，单位截面积（cm2）的光程内所含吸光物质的微克数，单位μg/cm2。 S=1/a ε = a M S=M/ε ε越大，S越小，灵敏度越高。 §8.6差示分光光度法和光度分析法的应用 一、差示分光光度法 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测液的浓度过大或过低，测量误差都较大。 1.定义：用采用浓度稍低于（高于）待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液代替普通光度法中以试剂空白作参比测量吸光度的方法 2.优点：改善普通分光光度法的测量误差 提高测量的灵敏度 3.分类：根据参比溶液，分为浓溶液差示法、稀溶液差示法和高精密度差示法 测c2：A相对=εbc相对=εb（c2-c1） 一元弱酸：c=[HB]+[B] 设有混合物含X和Y两种组分。已知X在波长λ1和λ2处的ελ1=1.80×103（L/mol.cm）和ελ2=2.80×104（L/mol.cm），Y在这两个波长处的ελ1=2.04×104L/（mol.cm）和ελ2=3.13×102（L/mol.cm）。相同液层厚度（b=1.00cm）的混合物溶液在λ1处测得的吸光度为0.301，在λ2处测得的吸光度为0.398。求混合物溶液中X和Y的浓度。 解：据题意，有如下方程： 0.301=1.80×103CX+2.04×104CY 0.398=2.80×104CX+3.13×102CY 解得：CX=1.41×10-5 mol/L CY=1.35×10-5 mol/L λ1 λ2 X Y X+Y A λ Aλ1 Aλ2 AX,λ1 AY,λ1 AY,λ2 AX,λ1 两组分相互干扰时的吸收光谱 A C A ? （8）吸收曲线（A-λ）（做法） （9）标准（工作）曲线（A-c）： c一定，b一定，改变波长λ， 测得相应的A，做A与λ的关系 曲线，目的：确定λmax。 A未 c未 λmax 标准曲线做图过程中，浓度C单位经常用ug/mL, mg/mL, ug/50mL, mg/50mL表示 c未单位与之对应。 样品的浓度根据稀释倍数和要求进行计算。 桑德尔灵敏度 三、偏离比尔定律的原因： 理想状态下，当波长和强度一定的入射光通过液层厚度一定的有色溶液时，A∝c。 正常 正偏 负偏 C CX 0 AX A 2.化学因素：高浓度时，粒子间有相互作用力，不能独立存在，使吸