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SRTP项目中期报告 马铃薯水通道蛋白的表达调控机制研究 指导老师：王丽 主持人： 卢汉文 组员：马义彬 闫冬冬 李正娟 苏其红 一、项目的意义 已有研究表明拟南芥中的AtRD28以及番茄 (Lycopersicon esculentum) 中的TRAMP是在干旱诱导下表达量增加的 水通道蛋白基因。本试验对马铃薯进行干旱胁迫，利用实 时荧光定量PCR技术研究马铃薯水通道蛋白基因的表达调 控，为马铃薯水通道蛋白基因功能研究及其利用提供理论 依据。 二、项目的研究内容 马铃薯组培苗的扩繁，设计荧光实时定量PCR引物； 马铃薯试管苗进行处理，不同组织器官总RNA的提取及cDNA的合成； 马铃薯荧光实时定量PCR分析； 三、实验预期成果 通过荧光实时定量PCR技术分析干旱胁迫和不同 激素处理下马铃薯水通道蛋白基因的表达调控机制，为该基因的功能研究及利用奠定基础。 四、项目实施的环节和具体方法 （一）实施环节 扩增引物合成 内参基因选择 干旱处理 激素处理 总RNA提取 cDNA合成 实时荧光PCR分析 组培苗扩繁 (二)具体的时间安排 2013年1月-2月：查阅相关文献； 2013年3月-5月：马铃薯组培苗的扩繁，设计荧光实时定量PCR引物； 2013年6月-7月：马铃薯试管苗进行处理，不同组织器官总RNA的提取及cDNA的合成； 2013年8月-9月：马铃薯荧光实时定量PCR分析； 2013年10月-11月：整理数据，撰写结题报告。 五、项目的进展情况 1.马铃薯组培苗的扩繁。 2. 设计荧光实时定量PCR引物； 3.对马铃薯试管苗进行处理: a.激素处理（100μmol/L ABA、5mmol/L SA、100μmol/L GA3、100μmol/L MEJA）1d后进行根茎叶实时定量PCR分析； b.干旱处理（PEG-6000浓度为45 mmol/L）0、6h、12h、1d、2d、3d、1w后分别取样进行根茎叶实时定量PCR分析； 六、前期实验过程中遇到的困难和问题 试管苗扩繁量比较大； 天气热试管苗难生根； 由于上课、考研等原因致使试验进度慢； 其他； 七、后期试验计划及相关安排 2013年6月-7月：马铃薯试管苗进行处理，不同组织器官总RNA的提取及cDNA的合成； 2013年8月-9月：马铃薯荧光实时定量PCR分析； 2013年10月-11月：整理数据，撰写结题报告。 谢谢，请老师指正！